[發(fā)明專利]一種基于BiVO4

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202110205845.4
• 申請(qǐng)日: 2021-02-24
• 公開（公告）號(hào): CN112986346B
• 公開（公告）日: 2022-11-11
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 李紅坤;接貴芬
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 青島科技大學(xué)
• 主分類號(hào): G01N27/26
• 分類號(hào): G01N27/26;G01N27/327;G01N21/76;C12Q1/6825
• 代理公司: 青島中天匯智知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 37241
• 代理人: 袁曉玲

1.一種利用BiVO₄/Ag₂S異質(zhì)結(jié)的光電化學(xué)生物傳感器的制備方法，其由下列步驟組成：

步驟1.制備CP-MB：10 μL 5 mg/mL磁珠MB用等體積的乙磺酸MES緩沖溶液純化后，加入50 μL 0.5 M的EDC和NHS活化羧基1小時(shí)，然后加入30 μL 4 μM的帶氨基的CP DNA鏈反應(yīng)過(guò)夜，利用磁性分離除去未反應(yīng)的DNA鏈，重新分散到等體積的二次水中得到CP-MB，保存在4°C下備用；

步驟2. 制備銀簇：將30 μL 4 μM 的富含胞嘧啶的CR DNA鏈加入到制備好的CP-MB中孵育2h，經(jīng)磁性分離后得到CR-CP-MB；然后將30 μL 20 mM 硝酸銀加入到上述溶液中劇烈攪拌1分鐘，放在4 °C下孵育1小時(shí)，然后將新鮮制備的30 μL 20 mM 還原劑硼氫化鈉加入到上述溶液中，劇烈攪拌1分鐘，在4 °C下避光反應(yīng)過(guò)夜制備銀簇；最后利用磁性分離除去多余的未反應(yīng)的核酸序列和反應(yīng)試劑，重新分散到等體積二次水中備用；

步驟3.制備BiVO₄：將0.2925 gNH₄VO₃和1.2125 gBi(NO₃)₃·5H₂O 分散到50 mL二次水中，不斷攪拌得到黃色沉淀，接著過(guò)濾沉淀并用水純化，在60 °C下干燥過(guò)夜，然后在馬弗爐中500 °C下加熱4小時(shí)得到BiVO₄；

步驟4. 基于BiVO₄/Ag₂S異質(zhì)結(jié)傳感器制備過(guò)程：將1 mg BiVO₄粉末分散到1 mL含0.2%的殼聚糖水溶液中，超聲分散半小時(shí)得到富含氨基的BiVO₄溶液；然后取10 μL該溶液滴到羥基化處理后的氧化銦錫電極上自然干燥，然后將該電極浸泡到50 mMNa₂S溶液中吸附1分鐘，然后用二次水潤(rùn)洗去掉多余的硫離子；將10 U 外切酶三和不同濃度的目標(biāo)P53加入到30 μL 制備好的銀簇中在37 °C下孵育70分鐘，然后通過(guò)磁性分離釋放銀簇；將5 μL 30%的雙氧水加入到釋放的銀簇中得到銀離子，然后將銀離子滴到制備好的電極上反應(yīng)形成BiVO₄/Ag₂S異質(zhì)結(jié)，自然干燥后用于PEC信號(hào)檢測(cè)。