[發(fā)明專利]抗體組合物及其在檢測急性B淋巴細(xì)胞白血病中的應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202110202574.7
• 申請日: 2021-02-24
• 公開（公告）號: CN112552407B
• 公開（公告）日: 2021-05-25
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 王卉;陳曼;王愛先;傅旻婧
• 申請（專利權(quán)）人: 信納克（北京）生化標(biāo)志物檢測醫(yī)學(xué)研究有限責(zé)任公司
• 主分類號: C07K16/28
• 分類號: C07K16/28;G01N15/14
• 代理公司: 北京三友知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11127
• 代理人: 韓蕾;姚亮

本發(fā)明提供了一種抗體組合物及其在檢測急性B淋巴細(xì)胞白血病中的應(yīng)用。所述抗體組合物包括四組抗體，第一組抗體包括CD38抗體、抗CD10抗體、抗CD34抗體、抗CD19抗體、抗CD20抗體和抗CD45抗體；第二組抗體包括抗胞漿CD79a抗體；第三組抗體包括抗CD81抗體、抗CD34抗體、抗CD10抗體和抗CD45抗體；第四組抗體包括抗TdT抗體和抗胞漿CD79a抗體。本發(fā)明的抗體組合物可應(yīng)用于流式細(xì)胞術(shù)檢測急性B淋巴細(xì)胞白血病和/或骨髓微小殘留病，可以有效設(shè)門選出B細(xì)胞，其中包括CD19?的B細(xì)胞和CD19+的B細(xì)胞，使其覆蓋最完整的不成熟B細(xì)胞群乃至B細(xì)胞群，降低漏診概率。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種抗體組合物及其在檢測急性B淋巴細(xì)胞白血病中的應(yīng)用，屬于血液病檢測技術(shù)領(lǐng)域。

背景技術(shù)

近年來，白血病/淋巴瘤發(fā)病率明顯增加，已成為影響人類健康的重要疾病之一，急性淋巴細(xì)胞白血病（acute lymphoblastic leukaemia, ALL）占所有白血病的15%，約占急性白血病的30%-40%，其中80-85%是B細(xì)胞型（B-ALL）。在美國，ALL發(fā)病率是每年1.38/10萬，2019年約有5930例新增病例，1500例死亡。國內(nèi)研究顯示，2008～2012年上海市男性ALL的發(fā)病率為0.86/10萬，女性ALL的發(fā)病率為0.76/10萬，較1986～1988年發(fā)病率0.69/10萬有所上升。

隨著靶向治療等新療法的不斷出現(xiàn)，使死亡率很高的白血病、淋巴瘤有了可治愈的希望，目前治療方法除傳統(tǒng)的化療及靶向藥物外，細(xì)胞免疫治療已成為新的發(fā)展方向。嵌合抗原受體T細(xì)胞（Chimeric Antigen Receptors T cell，CAR-T）通過基因改造T細(xì)胞實(shí)現(xiàn)對腫瘤相關(guān)抗原特異性識別，使效應(yīng)T細(xì)胞充分發(fā)揮抗腫瘤作用，是目前細(xì)胞免疫治療的重點(diǎn)，也是本世紀(jì)初最矚目的醫(yī)學(xué)成就之一，特別在急性B淋巴細(xì)胞白血病（B-ALL）等血液系統(tǒng)疾病治療上獲得了極為顯著的效果，常規(guī)治療無效的難治復(fù)發(fā)病例緩解率可以高達(dá)90%。但是因?yàn)橹T多原因，該方法達(dá)到長期緩解的不足50%，治療后注意監(jiān)測，早期發(fā)現(xiàn)微小殘留病（Minimal Residue Disease，MRD），早期進(jìn)行橋接移植或者二次CAR-T治療，是重中之重。

流式細(xì)胞術(shù)（Flow Cytometry，F(xiàn)CM）是一種能夠?qū)蝹€(gè)細(xì)胞實(shí)現(xiàn)定量分析的檢測手段，具有快速、高精度、多參數(shù)等優(yōu)點(diǎn)，是目前最先進(jìn)的細(xì)胞定量分析方法之一。FCM在臨床及科研領(lǐng)域都發(fā)揮著重要作用，特別在臨床體外診斷已有非常廣泛和深入的應(yīng)用，成為最主流的檢測手段之一，目前FCM的檢測結(jié)果是白血病、淋巴瘤等惡性疾病臨床診斷的金標(biāo)準(zhǔn)。

利用FCM對B-ALL患者進(jìn)行骨髓MRD檢測是重要的預(yù)后變量，使用特定的抗體組合物，配合多色流式細(xì)胞儀，可以有效評估預(yù)后、檢測復(fù)發(fā)，并能夠指導(dǎo)治療方案的選擇，是B-ALL必不可少的臨床評價(jià)指標(biāo)。然而，抗體組合物的正確選擇是實(shí)現(xiàn)上述目的的關(guān)鍵所在，例如最為常規(guī)的分析方案是胞膜泛B細(xì)胞標(biāo)志CD19輔以SSC或者CD45（CD19/SSC或者CD45/CD19雙參數(shù)）進(jìn)行設(shè)門選出B細(xì)胞，但在對于CD19-CAR-T細(xì)胞輸注治療后的患者上，使用CD19進(jìn)行設(shè)門則不再適用，原因是治療后部分正常或異常的B細(xì)胞表面CD19抗原已呈現(xiàn)表達(dá)丟失或減弱，因此亟需找到新的有效方案能夠設(shè)門選出目的B細(xì)胞。

為解決該問題，科研人員已做過研究性的探索，包括華盛頓大學(xué)的研究使用CD22聯(lián)合CD24+/CD66c-設(shè)門B細(xì)胞在CAR-T細(xì)胞輸注治療后檢測MRD，但其依然存有如下缺陷：1、CD24在B-ALL的表達(dá)率為80.6%，尤其是MLL基因重排的ALL-B中，易于出現(xiàn)CD24表達(dá)減低或者丟失，從而影響B(tài)細(xì)胞的圈門效率，2、CD22在嗜堿性粒細(xì)胞、漿細(xì)胞樣樹突細(xì)胞、肥大細(xì)胞中均表達(dá)或者弱表達(dá)，所以特異性并不佳，并且CD22抗原在正常B細(xì)胞的成熟過程中，隨著細(xì)胞的成熟CD22表達(dá)強(qiáng)度逐漸增強(qiáng)，而在B-ALL中，原始B細(xì)胞CD22表達(dá)減低，從而影響了CD22設(shè)門選出B細(xì)胞的靈敏度。3、不適用于CD22-CAR-T細(xì)胞或CD19-CD22-CAR-T雙靶點(diǎn)細(xì)胞輸注治療的患者。

發(fā)明內(nèi)容