[發明專利]一種基于多通道光纖共振譜儀檢測牛奶中三聚氰胺和雙酚A的方法

在審

• 申請號: 202110199464.X
• 申請日: 2021-02-22
• 公開（公告）號: CN112858225A
• 公開（公告）日: 2021-05-28
• 發明（設計）人: 丁利;清江;李明安;王季誠
• 申請（專利權）人: 寧波海歌電器有限公司
• 主分類號: G01N21/552
• 分類號: G01N21/552;G01N21/01
• 代理公司: 天津創智睿誠知識產權代理有限公司 12251
• 代理人: 李薇

本發明公開了一種基于多通道光纖共振譜儀檢測牛奶中三聚氰胺和雙酚A的方法，S1.取牛奶標準溶液分別加入三聚氰胺抗體和雙酚抗體，制成樣品孵化標準溶液：使多通道光纖共振譜儀的SPR傳感器表面羧基化；分別固定在光纖SPR傳感器表面活化的BPA?BSA和帶有BSA的三聚氰胺包被原；將樣品孵化標準溶液分別通入樣品池中進樣檢測，得到偏移量?三聚氰胺濃度及雙酚A濃度的二元二次方程；取待檢測樣品前處理制成待檢測樣品溶液，通入樣品池中進樣檢測，測定出偏移量帶入的二元二次方程中計算得出待檢測樣本中三聚氰胺和雙酚A的含量。利用多通道光纖共振譜儀，基于間接競爭法利用SPR免疫傳感測定待檢測樣品中雙酚A和三聚氰胺的濃度，實時快速檢測多種物質。

技術領域

本發明屬于食品檢測技術領域，尤其是涉及一種基于多通道光纖共振譜儀檢測牛奶中三聚氰胺和雙酚A的方法。

背景技術

隨著人們生活水平的提高，消費的牛奶量顯著提高。近年來，在奶粉或牛奶中發現化工原料三聚氰胺，三聚氰胺影響人身健康。雙酚A是制造環氧樹脂、聚碳酸樹脂、聚苯乙烯樹脂的主要原料，又是用于酚醛樹脂、聚氯乙烯、抗氧化劑等的穩定劑，不少研究表明，暴露于雙酚A環境中的三聚氰胺會引發多種健康問題，例如焦慮、短期失憶、肥胖、糖尿病和心血管疾病，為了保證人們的健康，需要對牛奶及其他飲食中三聚氰胺和雙酚A的含量進行控制。

目前，三聚氰胺(Melamine,MEL)和雙酚A(Bisphenol,BPA)的檢測方法主要包括高效液相色譜法、氣相色譜法、離子色譜法、氣質聯用和液質聯用，上述方法雖然檢測準確，但需要復雜的前處理，檢測儀器昂貴，檢測成本高，難以滿足大量樣品的快速檢測需求，并且無法同時檢測出牛奶中的三聚氰胺和雙酚A。

利用表面等離子體共振(Surface Plasmon Resonance，SPR)生物光學儀器檢測牛奶中的三聚氰胺和雙酚A殘留物是一種快捷、靈敏的技術手段，國內外有多篇論文及專利報道了包括牛奶在內的不同體系下，三聚氰胺或雙酚A的檢測方法。但未見同時檢測牛奶中三聚氰胺和雙酚A的報道。目前公開的檢測三聚氰胺和雙酚A的方法中，是對待測樣品的兩步孵育，將對多種殘留物的檢測轉化為對同一標記物的測量，孵育步驟復雜。

因此，為了解決上述技術問題，需要一種檢測成本低，適用于大量且快速檢測牛奶中三聚氰胺和雙酚A的檢測方法。

發明內容

本發明的目的是提供一種快速實時檢測多種物質、檢測成本低、檢測結果準確的基于多通道光纖共振譜儀檢測牛奶中三聚氰胺和雙酚A的方法。

本發明的技術方案如下：

一種基于多通道光纖共振譜儀檢測牛奶中三聚氰胺和雙酚A的方法，包括以下步驟：

S1.取牛奶標準溶液，加入磷酸緩沖鹽溶液按質量百分比1:25、1:50、1:100、1:200、1:500、1:1000稀釋，并向稀釋后的混合液中分別加入20μg/mL的三聚氰胺抗體和雙酚抗體，孵化5分鐘，制成樣品孵化標準溶液：

S2.將多通道光纖共振譜儀的SPR傳感器一和SPR傳感器二的表面清洗干凈，使SPR傳感器表面羧基化；

S3.使用固定在光纖SPR傳感器一表面活化的羧基連接固定雙酚A-牛血清蛋白溶液(BPA-BSA)，固定在光纖SPR傳感器二表面活化的羧基連接帶有BSA的三聚氰胺包被原；