[發(fā)明專利]殼聚糖酶OUC-CsnPa及其應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202110196686.6
• 申請(qǐng)日: 2021-02-22
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN112708609B
• 公開(kāi)（公告）日: 2022-03-22
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 毛相朝;孫建安;蘇海鵬;劉振;黃海燕
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 中國(guó)海洋大學(xué)
• 主分類號(hào): C12N9/42
• 分類號(hào): C12N9/42;C12N15/56;C12N15/70;C12N1/21;C12P19/26;C12P19/14;C12R1/19
• 代理公司: 濟(jì)南光啟專利代理事務(wù)所(普通合伙) 37292
• 代理人: 張瑜

本發(fā)明公開(kāi)了殼聚糖酶OUC?CsnPa，其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。編碼殼聚糖酶OUC?CsnPa的基因，其核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。所述殼聚糖酶OUC?CsnPa在降解殼聚糖/制備殼寡糖中的應(yīng)用。一種包含殼聚糖酶OUC?CsnPa的酶制劑。本發(fā)明的殼聚糖酶OUC?CsnPa，作用高乙酰度殼聚糖底物時(shí)，可產(chǎn)生更多的帶乙酰基殼寡糖，對(duì)乙酰基的A單元也展現(xiàn)了相比于一般殼聚糖酶更優(yōu)的偏好性。本發(fā)明的殼聚糖酶OUC?CsnPa具有優(yōu)良的酶學(xué)性質(zhì)和特異性，在酶法制備乙酰殼寡糖中具有重要的工業(yè)應(yīng)用價(jià)值以及經(jīng)濟(jì)價(jià)值。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種特異性殼聚糖酶OUC-CsnPa，及其在降解殼聚糖、制備殼寡糖中的應(yīng)用，屬于功能酶技術(shù)領(lǐng)域。

背景技術(shù)

殼聚糖是由β-1，4糖苷鍵連接的N-乙酰氨基葡萄糖(GlcNAc)和氨基葡糖糖(GlcN)的線性聚合物。其中A和D分別代表乙酰化GlcNAc和脫乙酰化GlcN殘基。殼寡糖是殼聚糖降解的產(chǎn)物,能被廣泛應(yīng)用于食品、農(nóng)業(yè)、醫(yī)藥、化妝品、保健品等領(lǐng)域。因?yàn)槠浞肿淤|(zhì)量低,水溶性好,具有許多生理活性,如抗氧化、抗腫瘤、降膽固醇、降血壓、降血脂、抗炎、免疫-刺激性以及抑菌等。有研究表明殼寡糖的這些生理活性主要與其聚合度相關(guān)，但越來(lái)越多的研究顯示部分乙酰化的殼寡糖(paCOS)的生物學(xué)活性也依賴于A單元的豐度(DA)。而殼聚糖酶對(duì)不同乙酰化度的殼聚糖具有不同的偏好性，這就決定了不同殼聚糖酶可生產(chǎn)相比于物理和化學(xué)法生產(chǎn)的可定義明確的paCOS混合物。確定的paCOS混合物的生產(chǎn)對(duì)于研究結(jié)構(gòu)-功能關(guān)系，以及開(kāi)發(fā)合適的高值化產(chǎn)品具有重要意義。因此，通過(guò)殼聚糖酶的酶促重復(fù)水解制備可控制的和確定組成的paCOS越來(lái)越受到關(guān)注。

發(fā)明內(nèi)容

針對(duì)上述現(xiàn)有技術(shù)，為彌補(bǔ)現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明提供了一種乙酰產(chǎn)物定義明確的新型殼聚糖酶——?dú)ぞ厶敲窸UC-CsnPa。

本發(fā)明是通過(guò)以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的：

殼聚糖酶OUC-CsnPa，其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。

SEQ ID NO.1：

MILLSFTVIA SFSSLSGPSP AKAFAEENGT TVQETVDLNE GDNSNEASTE SLSLTNEEATSQAAVTATDH DANFSPSTLQ FLKANTGLDG EQWDNIMKLV NKPEQDSLKW TEFYGYAEDI GDNRGYTIGIFGATTGGSND TGPDGPDLFK AFDAASGASS PSIAGGLTRA GLKGKMSGSI LKLSDSDSVI KKKIKALQNNEAWREAMWRT FYDTYIKYSV QQAQKRGFNT ALTIGSFVDT ALNQGATGDS GSLEGILSRS GSSTNEKTFMTNFYAKRTLI VDTNDYNQPP NGKNRVKQWS SLLASGETDL KNADAAVIKV TNWEMK。

一種編碼上述殼聚糖酶OUC-CsnPa的基因，其核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。

SEQ ID NO.2：