[發明專利]一種針對新型冠狀病毒的核酸適體納米顆粒及其制備方法和應用

有效

• 申請號: 202110190184.2
• 申請日: 2021-02-18
• 公開（公告）號: CN113041357B
• 公開（公告）日: 2022-11-01
• 發明（設計）人: 楊朝勇;宋彥齡;孫淼;宋婷;盧瑤;黃佳傲
• 申請（專利權）人: 廈門大學
• 主分類號: A61K47/69
• 分類號: A61K47/69;A61K31/7088;G01N33/543;G01N33/569;A61P31/14;B82Y5/00;B82Y40/00
• 代理公司: 廈門市首創君合專利事務所有限公司 35204
• 代理人: 張松亭;游學明

本發明公開了一種針對新型冠狀病毒的核酸適體納米顆粒及其制備方法和應用，其中，制備方法包括如下步驟：1)將一種或多種新型冠狀病毒的核酸適體末端分別接poly A或T尾，并將核酸適體和對應的Poly T或A混合，形成序列末端穩定的核酸適體的混合物；2)將序列末端穩定的核酸適體混合物偶聯到納米顆粒表面，核酸適體納米顆粒。

技術領域

本發明涉及一種針對新型冠狀病毒的核酸適體納米顆粒及其制備方法和應用。

背景技術

2019新型冠狀病毒(SARS-CoV-2或2019nCoV)是在人體中發現的冠狀病毒新毒株，是目前已知的第7種可以感染人的冠狀病毒。人感染了新冠病毒后常見體征有發熱、咳嗽、氣促和呼吸困難等，在較嚴重的病例中，感染可導致肺炎、嚴重急性呼吸綜合征、腎衰竭，甚至死亡。不僅如此，新冠病毒還具有廣泛的傳染能力。據美國約翰斯·霍普金斯大學發布的疫情統計顯示，自2020年1月新冠疫情爆發以來，截止到2020年11月底，全球累計新冠確診病例超過六千萬，全球平均每日新增確診病例二十萬；每18秒就有1人因新冠病毒死亡，累計死亡人數已達到142萬。

新型冠狀病毒的感染是通過病毒表面的刺突糖蛋白(S蛋白)與細胞表面受體血管緊張素轉化酶2(ACE2)的結合而啟動的，其中S蛋白介導了受體結合與膜融合過程。S蛋白是三聚體，由兩個功能性亞基S1和S2組成，其中S1亞基包含有負責與ACE2結合的受體結合域(RBD)，而S2亞基則負責細胞膜融合過程。S蛋白既有封閉構象也有開放構象，以混合結構共存。當ACE2結合一個開放位點后，S蛋白構象就會變得開放，并開始一系列有利于與受體細胞結合的構象變化。一旦S蛋白在所有三個結合位點上與ACE2結合，它的中央核心S2就會暴露出來，從而SARS-CoV-2與細胞膜融合。

由于冠狀病毒廣泛的宿主性以及自身基因組的結構特征，使其在進化過程中很容易發生突變。目前已知的新冠病毒突變中，D614G突變—S1的第614位天冬氨酸(D)突變成甘氨酸(G)占比74％，已成為主流的突變病毒毒株。與未突變的病毒相比，突變后的S蛋白開放構象大大增加，與ACE2結合的概率顯著提高，從而表現出更強地感染人體細胞的能力。有研究表明，與未突變的病毒相比，其感染能力約為未突變病毒的九倍。

現在對于新型冠狀病毒的感染沒有特異性的治療方法，大多根據患者的臨床情況進行診療。因此，針對新冠病毒適體抑制劑的研發刻不容緩。

發明內容

本發明的主要目的，在于提供一種針對新型冠狀病毒的核酸適體納米顆粒的制備方法。

本發明解決其技術問題的所采用的技術方案是：

一種針對新型冠狀病毒的核酸適體納米顆粒的制備方法，包括如下步驟：

1)將一種或至少兩種新型冠狀病毒的核酸適體末端分別接poly A或T尾形成核酸適體’，并將核酸適體’和對應的Poly T或A混合，形成序列末端穩定的核酸適體的混合物；

2)將序列末端穩定的核酸適體混合物偶聯到納米顆粒表面，獲得核酸適體納米顆粒。

在本發明優選實施例中，所述的納米顆粒包括金屬納米顆粒、脂質體納米顆粒、細胞外囊泡納米顆粒、外泌體納米顆粒中的至少一種。

在本發明優選實施例中，所述的納米顆粒的粒徑為2-500nm。優選為3-50nm。

在本發明優選實施例中，核酸適體種類為三種。

在本發明優選實施例中，核酸適體的序列分別為CoV2-1C、CoV2-4C和CoV2-6C3(見表1)。

在本發明優選實施例中，還包括CoV2-1C、CoV2-4C、CoV2-6C、CoV2-1、CoV2-C、CoV2-6C3序列的突變體或截短序列。