[發明專利]一種基于聲動力/免疫聯合治療的復合納米制劑、其制備方法及應用

有效

• 申請號: 202110186861.3
• 申請日: 2021-02-07
• 公開（公告）號: CN112933227B
• 公開（公告）日: 2022-10-11
• 發明（設計）人: 邵堃;上官曉燕;李廣哲;趙偉杰;王陽;王柳;張羽萱
• 申請（專利權）人: 大連理工大學
• 主分類號: A61K41/00
• 分類號: A61K41/00;A61K31/11;A61K39/39;A61K9/127;A61K47/24;A61P35/00;B82Y5/00
• 代理公司: 大連格智知識產權代理有限公司 21238
• 代理人: 劉曉琴

本發明公開了一種基于聲動力/免疫聯合治療的新型復合納米制劑、其制備方法及應用，其包括聲敏劑、免疫激活劑、活性氧增強藥物和脂質體，所述聲敏劑和活性氧增強藥物包載于所述脂質體磷脂雙分子層中，所述免疫激活劑嵌于所述脂質體磷脂雙分子層上。該方法包括步驟：①將所述聲敏劑、肉桂醛衍生物、MPLA、卵磷脂和DSPE?PEG5k配置成溶液；②將步驟①所得溶液中的溶劑蒸出后，將負載藥物脂質薄膜分散在緩沖液中，得到負載藥物的脂質體懸液；③將步驟②的溶液過聚碳酸酯膜，得復合納米脂質體。該制劑可誘導抗腫瘤反應，不僅可以阻止原位實體瘤的發展，還可以防止腫瘤向遠端組織轉移。尤其適用于聲動力治療和免疫療法的聯合治療制劑。

技術領域

本發明屬于多功能納米材料技術領域，具體涉及一種基免疫療法和聲動力療法相結合的新型復合納米制劑的制備方法及其抗腫瘤應用。

背景技術

癌癥對人類的生命健康造成嚴重威脅，根據世界衛生組織(WHO)的《2020年世界癌癥報告》，在未來的二十年中，全世界的癌癥病例數可能會增加60％。在中低收入國家中，增幅可能高達81％，癌癥的有效治療刻不容緩。現階段癌癥的臨床治療方式主要包括手術治療、化療、放療等。然而，上述傳統療法不僅治療效果有限，且易對身體產生極大負擔，腫瘤一旦發生轉移，更難以治愈。

聲動力療法SDT作為一種新興腫瘤無創治療方法，具有較強組織穿透能力、非電離性、高可控性和低成本等特點。在經典的SDT過程中，超聲激活聲敏劑產生的活性氧，通過凋亡或壞死途徑誘導癌細胞死亡。

研究證實，在SDT過程中產生的活性氧可以誘導腫瘤細胞產生免疫原性細胞死亡(ICD)，即發生凋亡的腫瘤細胞表面上調某些特征蛋白(如鈣網蛋白、高遷移率族蛋白B1等)作為“危險信號”，從而誘導未成熟的樹突細胞發育為成熟的樹突細胞，并將腫瘤抗原提呈給細胞毒性T細胞，最終啟動對腫瘤細胞的特異性殺傷。但由SDT促進機體產生的抗腫瘤免疫應答程度還不足以完全有效地殺死殘留腫瘤細胞或抑制腫瘤細胞形成遠端轉移灶。因此SDT與免疫療法的聯合應用將為腫瘤治療提供新思路：在殺傷原位實體瘤的同時打通抗腫瘤免疫應答環路，阻斷各種免疫逃逸和克服免疫抑制從而起到最優的腫瘤治療效果，并達到防止腫瘤轉移和復發的目的。

葉綠素衍生物是一類重要的聲敏劑，包括二氫卟吩e6及其衍生物,可以在超聲誘導下產生活性氧，誘導腫瘤細胞凋亡或壞死，實現殺傷原位實體瘤的目的。但是由于二氫卟吩e6 及其衍生物水溶性差，體內分布缺乏腫瘤靶向性等缺點，因此借助納米系統增強藥物的靶向遞送能力，提高其在腫瘤區域的蓄積量，實現藥物的持續釋放是一種有效的手段。

因此，構建一種新型納米制劑來實現聲動力和免疫療法聯合治療，并通過多種機制達到協調抑制腫瘤的作用，對腫瘤新型療法的探索具有重要意義。

發明內容

本發明構建了一種將聲敏劑、免疫激活劑以及增強細胞活性氧水平的藥物共遞送脂質體的新型納米制劑來實現聲動力和免疫療法聯合治療的目的。

本發明構建的脂質體系統可以改善二氫卟吩e6及其衍生物的水溶性，提高其在腫瘤組織中的蓄集能力，實現藥物的可控釋放，增強SDT對原位實體瘤的殺傷效果。免疫激活劑單磷酰脂質A(MPLA)是一種toll樣受體-4(TLR4)的激動劑，由于其脂質結構，可巧妙地嵌于脂質體磷脂雙分子層中，釋放后可激活樹突狀細胞并促進腫瘤相關抗原的呈遞、增加腫瘤浸潤淋巴細胞，從而激活免疫應答。肉桂醛(CA)已被證實可通過消耗細胞內硫醇提高線粒體活性氧水平以增強氧化應激，并介導線粒體通透性轉變和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶活化，從而促進細胞凋亡，因此具有增強SDT的腫瘤殺傷效果。

基于以上目的，本發明首先提供了一種復合納米脂質體，所述復合納米脂質體中包括：大豆卵磷脂(SPC)、二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇5000(DSPEm-PEG5k)、聲敏劑二氫卟吩e6三甲酯(Ce6Me₃)、肉桂醛衍生物(CA derivatives)和免疫激活劑單磷酰脂質 A(MPLA)。此復合納米脂質體制劑的結構示意圖如圖1。