[發明專利]用于診斷抗gp210抗體陽性與陰性PBC患者的糖鏈標志物及其用途

在審

• 申請號: 202110185224.4
• 申請日: 2021-02-10
• 公開（公告）號: CN113009147A
• 公開（公告）日: 2021-06-22
• 發明（設計）人: 胡朝軍;李晞;李斯亭;曾小莉;唐詩逸;李夢濤;曾小峰
• 申請（專利權）人: 中國醫學科學院北京協和醫院
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68
• 代理公司: 北京智為時代知識產權代理事務所(普通合伙) 11498
• 代理人: 王加嶺;楊靜

本發明通過采用含有56種凝集素的凝集素芯片檢測PBC中抗gp210抗體陽性患者與陰性患者血清IgG與凝集素特異性結合的聚糖差異。結果顯示，與陰性患者相比，BPL凝集素結合聚糖的含量在抗gp210抗體陽性患者中是升高的。由于BPL凝集素是特異性結合半乳糖，這表明半乳糖水平在抗gp210抗體陽性患者中的表達是升高的。凝集素免疫印跡驗證結果也表明BPL凝集素結合聚糖的含量在抗gp210抗體陽性患者中依然是升高的。可見，BPL凝集素與IgG結合所形成的復合物可作為用于診斷抗gp210抗體陽性PBC患者與抗gp210抗體陰性PBC患者的糖鏈標志物。

技術領域

本發明屬于生物檢測領域，具體涉及一種用于診斷抗gp210抗體陽性PBC患者與抗gp210抗體陰性PBC患者的糖鏈標志物及其用途。

背景技術

原發性膽汁性膽管炎(primary biliary cholangitis，PBC)，以前稱為原發性膽汁性肝硬化，是一種罕見的進行性肝內膽汁淤積性自身免疫疾病，其特征是肝小膽管逐漸受到破壞，可發展為肝纖維化，肝硬化，肝功能衰竭。抗線粒體抗體(AMA)是PBC的血清學標志。除AMA以外，大約50％的PBC患者和85％的AMA陰性PBC患者應發現ANAs(抗核抗體)的血清濃度升高。GP210是一種I型整合膜蛋白。抗gp210抗體是抗核抗體(ANA)的亞型(核膜型)，靶抗原是核孔復合物上的相對分子質量為210 000的跨膜糖蛋白。抗gp210抗體在PBC患者中的陽性率大約為l0％～40％，其對PBC診斷的特異性高達99％，是膽汁淤積和肝衰竭的危險因素。PBC患者gp210在小膽管上皮細胞的表達增加與小膽管炎性損傷相關，由此產生的自身免疫反應可能導致疾病向終末期發展。一些研究發現，抗gp210陽性與較高的血清膽汁淤積參數有關，并可以作為預后不良的指標。與抗gp210抗體陰性的患者比較，抗gp210抗體陽性的患者膽汁淤積更為嚴重、預后更差。

IgG是人體內含量最豐富的抗體。它參與多種體液免疫過程：抗原中和、補體激活和補體依賴性細胞毒(CDC)、抗體依賴性細胞介導的細胞毒(ADCC)和超敏反應。多糖是由多達15個單糖殘基組成的復雜低聚糖，約占IgG重量的15％，是IgG不可分割的部分，它組成的變化會影響IgG的結構穩定性、構象和半衰期，以及它的效應器功能。事實上，如果多糖完全去除會導致IgG促炎活性和抗炎活性的喪失。自從在類風濕性關節炎患者中發現IgG糖基化異常改變后，已有越來越多的證據表明IgG糖基化在自身免疫性疾病中發揮著重要的作用。本研究通過高通量的糖基化分析技術——凝集素微陣列技術來檢測抗gp210抗體陽性患者與陰性患者血清IgG糖基化修飾差異，以期探討糖基化兩者在PBC中的臨床應用價值。

發明內容

為了解決上述問題，本發明提供一種用于診斷抗gp210抗體陽性PBC患者與抗gp210抗體陰性PBC患者的糖鏈標志物及其用途。

首先，本發明提供一種用于診斷抗gp210抗體陽性PBC患者與抗gp210抗體陰性PBC患者的糖鏈標志物，其為BPL凝集素與IgG結合所形成的復合物。

其中，所述的IgG含有半乳糖。

其次，本發明還提供所述糖鏈標志物在用于制備診斷抗gp210抗體陽性PBC患者與抗gp210抗體陰性PBC患者的試劑中的用途。

具體地，所述診斷包括：測定待測的生物樣品中BPL凝集素與IgG結合所形成的復合物水平；任選地，

與對照數據比較所述生物樣品中BPL凝集素與IgG結合所形成的復合物的水平，其中，相對于所述對照數據，所述樣品中BPL凝集素與IgG結合所形成的復合物的水平可檢測地升高表明生物樣品來自PBC抗gp210抗體陽性的可能性。

其中，所述生物樣品為血清樣品。

本發明還提供BPL凝集素在制備用于診斷抗gp210抗體陽性PBC患者與抗gp210抗體陰性PBC患者的試劑中的用途。