[發明專利]可治愈性傳播感染病原體檢測體系及其試劑盒和應用

在審

• 申請號: 202110184657.8
• 申請日: 2021-02-10
• 公開（公告）號: CN112831581A
• 公開（公告）日: 2021-05-25
• 發明（設計）人: 張艷梅;趙虎;孫召洋;吳勇;南麗;余丁
• 申請（專利權）人: 華東醫院;寧波海爾施基因科技有限公司
• 主分類號: C12Q1/689
• 分類號: C12Q1/689;C12Q1/6888;C12Q1/686;C12Q1/04;C12N15/11
• 代理公司: 上海海頌知識產權代理事務所(普通合伙) 31258
• 代理人: 任益

1.一種可治愈性傳播感染病原體檢測體系，其特征在于：包括分別針對梅毒螺旋體、陰道毛滴蟲、沙眼衣原體、淋病奈瑟菌、解脲脲原體和人型支原體進行檢測的正反向引物，檢測樣本為生殖道分泌物。

2.根據權利要求1所述的可治愈性傳播感染病原體檢測體系，其特征在于：針對梅毒螺旋體的正向引物的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示，針對梅毒螺旋體的反向引物的核苷酸序列如SEQ ID No.2所示；

針對陰道毛滴蟲的正向引物的核苷酸序列如SEQ ID No.3所示，針對陰道毛滴蟲的反向引物的核苷酸序列如SEQ ID No.4所示；

針對沙眼衣原體的正向引物的核苷酸序列如SEQ ID No.5所示，針對沙眼衣原體的反向引物的核苷酸序列如SEQ ID No.6所示；

針對淋病奈瑟菌的正向引物的核苷酸序列如SEQ ID No.7所示，針對淋病奈瑟菌的反向引物的核苷酸序列如SEQ ID No.8所示；

針對解脲脲原體的正向引物的核苷酸序列如SEQ ID No.9所示，針對解脲脲原體的反向引物的核苷酸序列如SEQ ID No.10所示；

針對人型支原體的正向引物的核苷酸序列如SEQ ID No.11所示，針對人型支原體的反向引物的核苷酸序列如SEQ ID No.12所示。

3.根據權利要求2所述的可治愈性傳播感染病原體檢測體系，其特征在于：還包括針對人DNA內參進行檢測的正反向引物和針對系統質控內參進行檢測的正反向引物；所述人DNA內參對應的是人類10號染色體全基因組序列上的RP11-320F15位點，所述系統質控內參對應的是人工構建的假病毒的特征序列，檢測樣本為生殖道分泌物與系統質控內參的混合物；針對人DNA內參的正向引物的核苷酸序列如SEQ ID No.13所示，針對人DNA內參的反向引物的核苷酸序列如SEQ ID No.14所示；針對系統質控內參的正向引物的核苷酸序列如SEQ ID No.15所示，以及針對系統質控內參的反向引物的核苷酸序列如SEQ ID No.16所示。

4.根據權利要求3所述的可治愈性傳播感染病原體檢測體系，其特征在于：針對梅毒螺旋體和陰道毛滴蟲的正向引物在檢測體系中的終濃度均為400nM，針對梅毒螺旋體和陰道毛滴蟲的反向引物在檢測體系中的終濃度均為400nM；針對沙眼衣原體、淋病奈瑟菌、解脲脲原體、人型支原體、人DNA內參和系統質控內參的正向引物在檢測體系中的終濃度均為200nM；針對沙眼衣原體、淋病奈瑟菌、解脲脲原體、人型支原體、人DNA內參和系統質控內參的反向引物在檢測體系中的終濃度均為200nM。

5.根據權利要求1至4中任一項所述的可治愈性傳播感染病原體檢測體系，其特征在于：還包括多重PCR預混液、多重PCR酶液和無核酸酶純水；所述多重PCR預混液由10×PCR緩沖液、MgCl₂和dNTPs混合而成；所述多重PCR酶液由熱啟動DNA聚合酶和UNG酶混合而成。

6.根據權利要求1至4中任一項所述的可治愈性傳播感染病原體檢測體系，其特征在于：所有正向引物的5’端設有熒光標記，所述熒光標記為CY5或CY3或FAM。

7.根據權利要求1至4中任一項所述的可治愈性傳播感染病原體檢測體系，其特征在于：還包括陽性對照物和陰性對照物；所述陽性對照物是包括所有目的基因靶點的質粒混合物；所述陰性對照物是無核酸酶超純水。

8.根據權利要求5所述的可治愈性傳播感染病原體檢測體系，其特征在于：反應時體系中的組分用量為10×的PCR緩沖液1體積，10μM的dNTPs共0.2體積，25mmol/L的MgCl₂溶液0.8體積，引物混合物1體積，5U/μL的熱啟動DNA聚合酶0.4體積，1U/μL的UNG酶0.5體積，DNA模板5體積，無核酸酶純水1.1體積；所述DNA模板的使用量為5～50ng/體系。

9.一種包括如權利要求1所述的檢測體系的可治愈性傳播感染病原體檢測試劑盒。

10.一種采用如權利要求1所述的檢測體系制備可治愈性傳播感染病原體檢測和診斷產品的應用。