[發明專利]一種全氟化合物高通量靶標檢測方法及應用

在審

• 申請號: 202110181360.6
• 申請日: 2021-02-09
• 公開（公告）號: CN112986427A
• 公開（公告）日: 2021-06-18
• 發明（設計）人: 吳洪強;劉瑜;范艷群;王劍鋒;王云龍;楊磊;李春婷
• 申請（專利權）人: 上海百趣生物醫學科技有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06;G01N30/34;G01N30/86
• 代理公司: 上海微策知識產權代理事務所(普通合伙) 31333
• 代理人: 湯俊明

本發明公開了一種全氟化合物高通量靶標檢測方法及應用，包括以下步驟：S1樣品預處理：將樣品加入乙腈，渦旋混勻后靜置，離心，上清液A經氮氣吹干后，用提取液復溶，再次離心，得到上清液B；S2樣品檢測：制備標準溶液、繪制校準曲線、設置液相色譜和質譜的檢測條件進行樣品檢測、分析檢測結果。本發明樣品預處理過程簡單，所需的有機溶劑量少，并且本發明通過對液相色譜和質譜檢測條件的設定，提高了全氟化合物的檢測準確度和靈敏度，減少了試驗誤差，適合于血清中全氟化合物的檢測。

技術領域

本發明涉及生物化學檢測分析領域，具體涉及一種全氟化合物高通量靶標檢測方法及應用。

背景技術

全氟化合物(PFCs)是一種應用范圍廣闊的人工合成化合物，已經在環境中被廣泛檢測到，因其具有的持久性和生物累積性，可以通過食物鏈等方式進入各種生物體內，在生物體內的蓄積水平高于已知的有機氯農藥和二惡英等持久性有機污染物的數百倍至數千倍。全氟化合物還具有生殖毒性、誘變毒性、發育毒性、神經毒性、免疫毒性等多種毒性，是一類具有全身多臟器毒性的環境污染物。毒理學研究中可觀察到的全氟化合物對生物體造成的毒性影響包括：抑制免疫系統，影響線粒體代謝，導致肝細胞損傷，生殖細胞受損，降低繁殖與生育能力，影響胎兒的晚期發育，基因表達的改變，干擾酶活性，破壞細胞膜結構，改變甲狀腺功能等。因此，建立穩定、準確、快速的全氟化合物的分析檢測方法十分重要。

中國專利《一種血清中全氟及多氟化合物的高通量快速檢測方法》公開號：CN111624274A，公開了一種高通量檢測血清中全氟及多氟化合物的方法，樣品處理和檢測都運用到96孔板，樣品處理的步驟包括加入十二烷基硫酸鈉進行預處理，水浴反應后離心取得上清液，在上清液中加入內標物和萃取劑，進行反應和超聲萃取，樣品處理的步驟復雜。

發明內容

為了解決上述技術問題，本發明第一個方面提供了一種全氟化合物高通量靶標檢測方法，包括以下步驟：

S1樣品預處理：將樣品加入乙腈，渦旋混勻后靜置，離心，上清液A經氮氣吹干后，用提取液復溶，再次離心，得到上清液B。

S2樣品檢測：設置液相色譜和質譜的檢測條件，進行樣品的檢測。

進一步地，所述步驟S1中樣品與乙腈的體積比為1：(1-5)。

進一步地，所述步驟S1的提取液為甲醇、甲酸、乙腈、水中的一種或多種。

進一步地，所述步驟S2中液相色譜的流動相A為甲酸、甲酸水溶液、乙酸銨水溶液、鄰苯二甲酸水溶液中的一種或多種。

進一步地，所述步驟S2中液相色譜的流動相B為乙腈。

進一步地，所述步驟S2中液相色譜的洗脫條件為梯度洗脫。

進一步地，所述步驟S2中液相色譜的洗脫條件為：

0.00min，流動相A為75％，流動相B為25％；

0.50min，流動相A為75％，流動相B為25％；

2.70min，流動相A為60％，流動相B為40％；

7.00min，流動相A為5％，流動相B為95％；

9.00min，流動相A為5％，流動相B為95％；

9.10min，流動相A為75％，流動相B為25％；

12.00min，流動相A為75％，流動相B為25％。

進一步地，所述步驟S2中質譜的儀器為三重四極桿質譜儀。

進一步地，所述質譜儀的分析采用多反應監測分析。

本發明的第二個方面提供了一種全氟化合物高通量靶標檢測方法在血清中的應用。