[發(fā)明專利]一種表達(dá)GLP-1樣因子的重組菌及應(yīng)用

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 202110180373.1
• 申請日: 2021-02-08
• 公開（公告）號: CN112831516A
• 公開（公告）日: 2021-05-25
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 李明義;劉剛;馬鳳龍;崔曉辰;劉星華;劉毅;李易
• 申請（專利權(quán)）人: 青島海華萊康生物醫(yī)藥技術(shù)有限公司;青島海華生物醫(yī)藥技術(shù)有限公司
• 主分類號: C12N15/74
• 分類號: C12N15/74;C12N15/16;C12N1/21;C12P21/02;A61K38/26;A61K9/00;A61P3/10;A23L33/135;C12R1/01
• 代理公司: 山東三邦知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 37308
• 代理人: 肖太升;牛繼梅

1.一種表達(dá)GLP-1樣因子的重組表達(dá)載體，其特征在于，所述重組表達(dá)載體是在表達(dá)載體中插入有編碼GLP-1樣因子的核苷酸序列；

所述編碼GLP-1樣因子的核苷酸序列如SEQ ID No:1所示。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的表達(dá)GLP-1樣因子的重組表達(dá)載體，其特征在于，所述表達(dá)載體為pNZ8149。

3.一種表達(dá)GLP-1樣因子的重組菌，其特征在于，所述重組菌是由權(quán)利要求1或2所述的重組表達(dá)載體轉(zhuǎn)化導(dǎo)入到乳酸菌中所得。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述表達(dá)GLP-1樣因子的重組菌，其特征在于，所述乳酸菌為乳酸乳球菌NZ3900。

5.根據(jù)權(quán)利要求3或4所述表達(dá)GLP-1樣因子的重組菌，其特征在于，所述重組菌為乳酸乳球菌(Lactococcus lactis)HL19003，保藏編號為CCTCC NO：M 2020968。

6.權(quán)利要求5所述表達(dá)GLP-1樣因子的重組菌在制備預(yù)防和治療Ⅱ型糖尿病藥物或食品中的應(yīng)用。

7.權(quán)利要求5所述表達(dá)GLP-1樣因子的重組菌在制備具有促進(jìn)胰島素分泌和胰島細(xì)胞增殖功效的藥物或食品中的應(yīng)用。

8.使用權(quán)利要求5所述重組菌表達(dá)GLP-1樣因子的方法，其特征在于，步驟為：

(1)將保藏編號為CCTCC NO：M 2020968的重組菌株接種到M17培養(yǎng)基，30℃靜置培養(yǎng)20h；

(2)取步驟(1)培養(yǎng)后的培養(yǎng)液按3％接種到GM17培養(yǎng)基，30℃恒溫靜置培養(yǎng)，待OD₆₀₀nm至0.4，加入Nisin進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)。

9.根據(jù)權(quán)利要求8所述重組菌表達(dá)GLP-1樣因子的方法，其特征在于，所述Nisin加入終濃度為30ng/mL；誘導(dǎo)表達(dá)2-6h。

10.一種具有促進(jìn)胰島素分泌和胰島細(xì)胞增殖功效的生物制劑，其特征在于，是由權(quán)利要求9所述方法誘導(dǎo)后的菌液，經(jīng)離心去除菌體后的上清液。