[發明專利]一種具有免疫調控作用的復合水凝膠及其制備方法與應用

有效

• 申請號: 202110178444.4
• 申請日: 2021-02-09
• 公開（公告）號: CN112972772B
• 公開（公告）日: 2021-11-09
• 發明（設計）人: 彭一中;邵增務;卿湘城;田碩;劉勝;舒鴻洋;陳熹;李金燁
• 申請（專利權）人: 華中科技大學同濟醫學院附屬協和醫院
• 主分類號: A61L27/36
• 分類號: A61L27/36;A61L27/20;A61L27/08;A61L27/50;A61L27/52;A61L27/54;A61L27/56;A61L27/58;C08J3/075;C08L5/08;C08K9/04;C08K3/04
• 代理公司: 北京東方盛凡知識產權代理事務所(普通合伙) 11562
• 代理人: 王穎

1.一種具有免疫調控作用的復合水凝膠，其特征在于，所述復合水凝膠包括髓核脫細胞基質、通過化學交聯連接所述髓核脫細胞基質的氧化石墨烯以及通過橋接連接所述氧化石墨烯的透明質酸；

具有免疫調控作用的復合水凝膠的制備方法，包括以下步驟：

步驟1：將氧化石墨烯GO分散在水中后，分別加入1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽EDC和N-羥基硫代琥珀酰亞胺NHS，并用堿液調至pH5.5-5.8，然后再加入己二酸二酰肼ADH，常溫攪拌24h，得到GO-ADH；

步驟2：將透明質酸HA溶解在水中后，分別加入1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽EDS和N-羥基硫代琥珀酰亞胺NHS，并用堿液調至pH5.5-5.8，然后加入步驟1所得GO-ADH，常溫攪拌24-28h，得到GO-HA；

步驟3：將步驟2所得GO-HA溶解于醋酸中，并以GO-HA：DNP體積比為1:10-30混合，超聲處理得到HA-GO-DNP水凝膠；所得HA-GO-DNP水凝膠經過冷凍干燥、酸處理以及消化處理后，得到HA-GO-DNP復合水凝膠。

2.如權利要求1所述的具有免疫調控作用的復合水凝膠的制備方法，其特征在于，步驟1中GO：EDC：NHS的質量比為1：3-8：10-20；

GO：ADH的質量比為1：10-12。

3.如權利要求1所述的具有免疫調控作用的復合水凝膠的制備方法，其特征在于，步驟2中HA：EDC：NHS的質量比2：3-8：10-20；

HA：GO-ADH的質量比為(1-2)：(2-4)。

4.如權利要求1所述的具有免疫調控作用的復合水凝膠的制備方法，其特征在于，步驟1和步驟2中所述堿液均為1mg/mL的NaOH溶液。

5.如權利要求1所述的具有免疫調控作用的復合水凝膠的制備方法，其特征在于，步驟3中GO-HA與醋酸的質量/體積比例為0.1％-0.4％。

6.如權利要求1所述的具有免疫調控作用的復合水凝膠的制備方法，其特征在于，所述HA-GO-DNP水凝膠經過冷凍干燥、酸處理以及消化處理具體包括以下步驟：

所得HA-GO-DNP水凝膠于-50℃下冷凍干燥24h，形成多孔支架；

將所述多孔支架EDC和NHS溶液中浸泡24h，經蒸餾水清洗后，再于-50℃下冷凍干燥得到交聯HA-GO-DNP支架；

將所得的交聯HA-GO-DNP支架加入鹽酸中，調整所述交聯HA-GO-DNP支架濃度至5-10mg/mL，然后再加入胃蛋白酶，室溫攪拌24-28h后，離心去除難溶解的組織顆粒，并調整pH值至7.3-7.5，再于37℃水浴10-30min，得到所述HA-GO-DNP復合水凝膠。

7.如權利要求6所述的具有免疫調控作用的復合水凝膠的制備方法，其特征在于，EDC和NHS溶液的溶質濃度為水/乙醇＝5：95；所述EDC的濃度為50mM，所述NHS的濃度為20mM；

所述交聯HA-GO-DNP支架與胃蛋白酶的質量比為10-15：1。

8.一種如權利要求1所述的具有免疫調控作用的復合水凝膠的應用，其特征在于，應用于椎間盤組織工程材料的構建中。

9.如權利要求8所述的具有免疫調控作用的復合水凝膠的應用，其特征在于，應用于調節椎間盤免疫調控和緩解氧化應激的復合功能材料構建。