[發明專利]高大山羊草2Sl染色體特異分子標記的開發及其應用

有效

• 申請號: 202110174729.0
• 申請日: 2021-02-07
• 公開（公告）號: CN112760319B
• 公開（公告）日: 2022-08-09
• 發明（設計）人: 李歡歡;劉文軒;付巧;裴少龍;卞翔;孫正好;門文強;田修斌;陳麒帆;王貝麟
• 申請（專利權）人: 河南農業大學
• 主分類號: C12N15/11
• 分類號: C12N15/11;C12Q1/6895
• 代理公司: 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245
• 代理人: 閆書寧

本發明公開了高大山羊草2Sl染色體特異分子標記的開發及其應用。引物對組合包括引物對1、引物對2、引物對3和引物對4；引物對1包括Isoform15462?F和Isoform15462?R；引物對2包括Isoform7604?F和Isoform7604?R；引物對3包括Isoform20761?F和Isoform20761?R；引物對4包括Isoform26132?F和Isoform26132?R；各個引物的核苷酸序列依次如序列6、7、9、10、12、13、15和16所示。本發明可鑒定或輔助鑒定待測植物是否抗葉銹病，具有快速、低成本以及限制少等特點，可大大提高育種效率。本發明具有重大的應用價值。

技術領域

本發明屬于生物技術領域，具體涉及高大山羊草2Sl染色體特異分子標記的開發及其應用。

背景技術

普通小麥(Triticum aestivum L.，2n＝6x＝42，AABBDD)是全球種植面積最大的糧食作物，是人類最重要的植物蛋白來源。我國是世界四大小麥生產國之一，小麥生產在國家糧食安全和社會穩定中起著十分重要的作用。

小麥葉銹病由專性寄生真菌(Puccinia triticina)侵染所引起，具有破壞性強、循環式侵染、專性寄生等特點，是小麥銹病中發生最普遍的一種病害，在世界各小麥產區普遍發生，嚴重影響小麥的產量和品質。通常可減產5-15％，嚴重發病可使小麥減產40-70％。廣泛收集抗源、挖掘抗病基因、培育和推廣抗病新品種是減少葉銹病損失最經濟有效的途徑。

迄今為止，國內外已在小麥以及近緣物種的70多個位點鑒定出葉銹病抗性基因，但是隨著葉銹病生理小種的不斷變異以及新生理小種的不斷出現，大部分葉銹病抗性基因已失去或正在逐步喪失抗性，或因其與不良性狀緊密連鎖，而不能在生產上直接應用。因此，不斷發掘新的抗病基因，創制優異抗葉銹病新種質，對小麥抗葉銹病育種具有十分重要的實踐意義。

山羊草屬(Aegilops L.)是小麥近緣植物中與小麥關系最為密切的屬，蘊藏著豐富的抗病、抗蟲、抗逆和優質等優異基因。高大山羊草(Aegilops longissima，2n＝14，染色體組為S^lS^l)，是山羊草屬Sitopsis組的一個種，具有抗病、抗旱等多種優良性狀，是小麥育種的優異基因源；例如高大山羊草3S^l染色體短臂上攜帶抗小麥白粉病基因Pm13，1S^l、3S^l、5S^l和7S^l染色體上攜帶有抗眼斑病基因，1S^l染色體上攜帶有抗旱基因。迄今為止，還未見來自高大山羊草抗葉銹病基因的研究報道。

各類基因組或染色體特異的分子標記，因其不受環境和生育期的限制且簡單易操作，廣泛應用于小麥背景中外源物質的檢測。近年來，根據高通量測序建立的轉錄組測序，可以快速有效的獲取大量具有基因信息的轉錄組數據，并且其來自于基因的轉錄區，其中的特異性片段多與基因功能有關，是開發外源染色體特異分子標記的理想資源。因此,通過轉錄組測序開發高大山羊草2Sl染色體特異分子標記，對篩選鑒定分離群體材料以及選育抗病小麥品系/品種均具有重要意義。

發明內容

本發明的目的是提供高大山羊草2Sl染色體特異分子標記及其輔助鑒定待測植物是否抗葉銹病；植物可為小麥、小麥近緣屬及其雜交后代或小麥遠緣屬及其雜交后代。

本發明首先保護引物對組合。引物對組合可包括特異引物對1、特異引物對2、特異引物對3和/或特異引物對4；

特異引物對1可由引物Isoform15462-F和引物Isoform15462-R組成；引物Isoform15462-F的核苷酸序列可如SEQ ID NO:6所示；引物Isoform15462-R的核苷酸序列可如SEQ ID NO:7所示；