[發明專利]一種鵝掌楸轉錄因子LcbHLH52基因及其應用

有效

• 申請號: 202110174683.2
• 申請日: 2021-02-08
• 公開（公告）號: CN112746079B
• 公開（公告）日: 2021-10-22
• 發明（設計）人: 郝兆東;楊立明;王占軍;高敏;朱禮明;施季森;陳金慧
• 申請（專利權）人: 南京林業大學
• 主分類號: C12N15/29
• 分類號: C12N15/29;C07K14/415;C12N15/84;A01H5/00;A01H6/20
• 代理公司: 南京申云知識產權代理事務所(普通合伙) 32274
• 代理人: 邱興天

本發明公開了一種鵝掌楸轉錄因子LcbHLH52基因及其應用，屬于植物基因工程技術領域。本發明通過生物信息學工具對鵝掌楸bHLH家族序列進行分析，然后通過測序和同源比較，成功克隆出了LcbHLH52轉錄因子基因。對克隆到的LcbHLH52轉錄因子基因構建過表達載體，轉化擬南芥，獲得T1代種子；將LcbHLH52轉基因擬南芥T2代植株和野生型擬南芥植株同時放入4℃低溫處理3d，表型觀察發現轉基因植株的生長受到低溫脅迫的影響較小，而野生型植株生長受到抑制，葉片有萎蔫現象。結果表明鵝掌楸LcbHLH52基因可以增強擬南芥植株對低溫脅迫的耐受能力，在提高植物低溫脅迫的分子育種中具有重要應用價值。

技術領域

本發明屬于植物基因工程技術領域，更具體地說，涉及一種鵝掌楸轉錄因子LcbHLH52基因及其應用。

背景技術

中國鵝掌楸(Liriodendron Chinese)作為我國重要的珍稀樹種(國家二級保護植物)，具有科研、經濟、觀賞、藥用和生態等多方面的價值。主要體現在：1.對古植物學研究有重要科研價值；2.樹干端直、樹冠傘形、葉形奇特、花大而美麗，是優良的觀賞樹種；3.木材紋理直、干燥少開裂、輕軟適中、易加工、少變形、無蟲蛀，是室內裝修、制作家具的優質材料(劉建平，2020)。中國鵝掌楸主要分布在我國長江流域以南地區，且喜溫、喜濕潤(方炎明，1994；郝日明等，1995)，屬于冷敏感植物。由此可見，低溫限制了中國鵝掌楸在我國北方地區的大面積推廣。因此，培育耐低溫品種具有重要的實踐和理論意義(張欣，2010)。當前基因組測序技術的飛速發展推動了越來越多植物基因組的破譯。鵝掌楸基因組的發布將為解析其基礎生物學問題和重要性狀的分子機制奠定了基礎，同時也為分析和挖掘鵝掌楸調控重要性狀的基因提供了可能(Chen et al.，2019)。

鑒于植物bHLH轉錄因子家族序列相對保守且復雜多樣的結構域特點，賦予了其不同成員具有類似且不同的生物學功能。鵝掌楸基因組的破譯，這為進行bHLH轉錄因子家族的全基因組分析提供了前提(Chen et al.，2019)。因此，開展鵝掌楸bHLH轉錄因子的克隆與功能分析將有助于解析其生物學作用和有助于選育抗逆性的種質。

發明內容

針對現有技術存在的上述問題，本發明所要解決的技術問題在于本發明所要解決的技術問題在于提供一種鵝掌楸轉錄因子LcbHLH52基因。本發明所要解決的另一技術問題在于提供前述鵝掌楸轉錄因子LcbHLH52基因的應用。

為了解決上述技術問題，本發明所采用的技術方案如下：

一種鵝掌楸轉錄因子LcbHLH52基因，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。

所述的鵝掌楸轉錄因子LcbHLH52基因的表達蛋白，其氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。

含有所述鵝掌楸轉錄因子LcbHLH52基因的載體。

所述的鵝掌楸轉錄因子LcbHLH52基因在增強植物對低溫脅迫的耐受能力中的應用。

進一步地，所述的應用，包括以下步驟：

1)構建所述鵝掌楸轉錄因子LcbHLH52基因的載體；

2)將所構建的轉錄因子LcbHLH52基因的載體轉化到植物或植物細胞中；

3)培育篩選得到對低溫脅迫的耐受能力增強的植株。

進一步地，所述的應用中，所述的植物是擬南芥。

相比于現有技術，本發明的有益效果為：