[發明專利]一種元江霉素類似物、制備方法及其應用

有效

• 申請號: 202110167449.7
• 申請日: 2021-02-05
• 公開（公告）號: CN112920197B
• 公開（公告）日: 2023-08-01
• 發明（設計）人: 段燕文;朱湘成;莊周康
• 申請（專利權）人: 哈藥慈航制藥股份有限公司;長沙天賜生物醫藥科技有限公司;長沙慈航藥物研究所有限公司
• 主分類號: C07D493/18
• 分類號: C07D493/18;A61P35/00;C12P17/18;C12R1/465
• 代理公司: 長沙正奇專利事務所有限責任公司 43113
• 代理人: 馬強

本發明屬于生物醫藥技術領域，具體涉及元江霉素確認、制備方法及其抗腫瘤應用。所述元江霉素類似物，其結構式如下所示：本發明通過Streptomyces?sp.CB03234?S的發酵培養，然后設計特殊的分離純化步驟，采用特殊設計的梯度洗脫和特殊的洗脫劑，可以獲得純度超過97％的YJM?A和YJM?B，此制備工藝的建立極大地降低了元江霉素的分離純化成本。且本發明公開的YJM?A其抗腫瘤性能遠遠優于同類化合物。

技術領域

本發明涉及元江霉素類似物及其制備方法和抗腫瘤應用，屬于生物醫藥技術領域。

背景技術

放線菌是具有不同藥理特性的新型生物活性分子的重要來源，包括抗生素、抗真菌、抗寄生蟲和抗癌藥物。如今雖然大部分在使用骨架被發現在1940年到1960年代，但隨著測序技術和生物信息學分析，放線菌的生物合成潛力可能被低估了，因為幾乎每一個放線菌擁有超過20生物合成基因簇。然而，在實驗室條件下，大多數簇通常不表達或表達很少，這阻礙了新化合物的發現。因此，利用新的方法和技術激活微生物沉默基因簇，探索新的天然產物是放線菌天然產物研究領域的重要方向之一。核糖體工程技術以其不需要清晰的遺傳背景、操作簡單等廣泛應用于放線菌次級代謝產物產量提升和沉默基因簇激活。

Pluramycin(結構式如下)是一類抗腫瘤抗生素合成的Ⅱ型聚酮化合物,包括一個平面4-H-anthra(1、2b)吡喃發色團，攜帶兩個近端與遠端雙環氧乙烷-兩個氨基糖側鏈，典型代表有Hedemycin和Saptomycin。

其活性機制是：將兩個氨基糖嵌入到DNA溝槽中，然后二環氧乙烷暴露在DNA溝槽中，通過環氧化物的親電攻擊，將DNA堿基對與N7烷基化鳥嘌呤“連接”起來。插入主要發生在核苷酸突起附近，導致鳥嘌呤在突起上發生特異性烷基化。Pluramycin類天然產物對多種腫瘤細胞中均有顯著的活性(0.1～50nM)，是臨床藥物阿霉素的100多倍，具有很大的臨床開發潛力。

發明內容

本發明目的是提供一種新的元江霉素類似物及其制備方法和抗腫瘤應用。

為了解決上述技術問題，本發明的技術方案如下：

一種元江霉素類似物，其結構式如下所示：

其中，R1選自

R2選自氫、C1-C6烷基；R3選自-OH、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基。

優選的，R2為氫；R3為–OH；R1為

其中，R1為命名為YJM?A；R1為命名為YJM?B。

本發明還提供了所述元江霉素類似物的制備方法，包含以下步驟：

S1、將菌株Streptomyces?sp.CB03234-S進行培養、發酵；發酵產物過濾、洗滌、干燥、洗脫、萃取、濃縮得到粗提物；

S2、將粗提物裝柱、洗脫，得到粗分組分Fr.1；將其真空濃縮、進一步純化得到組分Fr.1.1和Fr.1.2；進一步洗脫Fr.1.1和Fr.1.2，得到YJM?A和YJM?B。

菌株Streptomyces?sp.CB03234-S，已于2017年9月25日保藏在武漢大學內的中國典型培養物保藏中心，保藏編號為CCTCC?M?2017538。

優選的，菌株培養基為胰蛋白酶大豆肉湯。

優選的，發酵培養基包括可溶性淀粉10g/L，棉籽粉5g/L，CuSO4?0.05g/L，NaI5mg/L，CaCO3?2g/L，1％大孔樹脂HP20。

優選的，菌種培養時間為36h；發酵條件為30℃,220rpm下發酵4d。