[發(fā)明專利]一株P(guān)seudozyma屬產(chǎn)油菌株及其應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202110164592.0
• 申請(qǐng)日: 2021-02-06
• 公開（公告）號(hào): CN112574932B
• 公開（公告）日: 2022-08-19
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 王莉;宋兆齊;梁峰
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 商丘師范學(xué)院
• 主分類號(hào): C12N1/20
• 分類號(hào): C12N1/20;C12P7/6463;C12R1/01
• 代理公司: 鄭州優(yōu)盾知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 41125
• 代理人: 冉珊敏

本發(fā)明屬于微生物菌種領(lǐng)域，涉及一株產(chǎn)油菌，特別是指一株Pseudozyma屬產(chǎn)油菌株及其應(yīng)用。所述菌株已于2020年11月2日保藏至中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心，保藏編號(hào)CGMCC No.20993。本申請(qǐng)篩選到的一株產(chǎn)油菌株，其最適培養(yǎng)基組成濃度為葡萄糖69.2g/L、蛋白胨1.8g/L、酵母膏10g/L，磷酸二氫鉀3.0g/L，pH5.5；最適發(fā)酵條件為28℃、160r/min條件下，以15%的接種量進(jìn)行接種，發(fā)酵120h，在此條件下所得發(fā)酵結(jié)果較為理想，較優(yōu)化前油脂產(chǎn)量提高了155.1%。且從實(shí)驗(yàn)結(jié)果可以看出，接種量與搖床轉(zhuǎn)速對(duì)產(chǎn)油菌PMD?A的生長(zhǎng)和胞內(nèi)油脂積累影響較大。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于微生物菌種領(lǐng)域，涉及一株產(chǎn)油菌，特別是指一株Pseudozyma屬產(chǎn)油菌株及其應(yīng)用。

背景技術(shù)

產(chǎn)油微生物是指那些胞內(nèi)油脂占其生物總量20%以上的菌株，由其發(fā)酵所得的微生物油脂又被稱為單細(xì)胞油脂（SCO），其組成與植物油類似，主要為中性脂、游離脂肪酸、磷脂及不皂化物，因其特殊功能而具有潛在的工業(yè)開發(fā)價(jià)值。目前，利用發(fā)酵法生產(chǎn)微生物油脂作為制備生物柴油的油料資源受到越來越多的關(guān)注。迄今為止，對(duì)產(chǎn)油微生物研究仍以酵母菌和霉菌為主。其中，中科院趙宗保所帶領(lǐng)的科研團(tuán)隊(duì)對(duì)油脂酵母、圓紅冬孢酵母、發(fā)酵性絲孢酵母等10多種產(chǎn)油酵母在產(chǎn)油機(jī)理、菌種選育、培養(yǎng)條件優(yōu)化、生物質(zhì)轉(zhuǎn)化利用等方面進(jìn)行了深入研究；國(guó)外油脂研究中心對(duì)卷枝毛霉和高山被孢霉利用碳源合成油脂的作用機(jī)制進(jìn)行研究。國(guó)內(nèi)福建師范大學(xué)微生物工程研究所、南開大學(xué)等研究單位對(duì)深黃被孢霉在菌株誘變、發(fā)酵條件優(yōu)化、中試生產(chǎn)等方面進(jìn)行研究，使變異株不論在菌體油脂含量還是油脂產(chǎn)量上均有很大程度的提高。而由本實(shí)驗(yàn)室篩選并鑒定的Pseudozyma屬產(chǎn)油菌株，利用其進(jìn)行發(fā)酵產(chǎn)油脂的研究還未見報(bào)道。因此，可把Pseudozyma屬產(chǎn)油菌株發(fā)酵產(chǎn)油脂作為一種新的微生物油脂資源，其研究具有深遠(yuǎn)的意義。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明提出一株Pseudozyma屬產(chǎn)油菌株及其應(yīng)用，并進(jìn)一步探討了碳源濃度、氮源種類及濃度對(duì)Pseudozyma屬產(chǎn)油菌株脂肪酸組成含量的影響。

本發(fā)明的技術(shù)方案是這樣實(shí)現(xiàn)的：

一株Pseudozyma屬產(chǎn)油菌株，所述菌株已于2020年11月2日保藏至中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心，保藏編號(hào)CGMCC No.20993，分類名為Pseudozymaaphidis，保藏地址：中國(guó)北京。

上述的Pseudozyma屬產(chǎn)油菌株的培養(yǎng)方法，其特征在于：將Pseudozyma屬菌株菌液按照10-20%的接種量，接種到培養(yǎng)基中培養(yǎng)，培養(yǎng)條件為pH5-7，于28℃、140r/min培養(yǎng)，發(fā)酵120h。

所述培養(yǎng)基中的原料濃度為：葡萄糖40-80g/L、氮源0.4g/L、酵母膏10g/L、磷酸二氫鉀2.0-3.0g/L，pH5-7，其中氮源為硫酸銨、尿素或蛋白胨。

上述的Pseudozyma屬菌株在作為工程菌發(fā)酵高產(chǎn)油脂中的應(yīng)用，其油脂脂肪酸組成類似植物油，可以作為生產(chǎn)生物柴油的原料油，當(dāng)油脂飽和脂肪酸含量高時(shí)，制備生物柴油時(shí)可獲得高的生物柴油十六烷值和較高的氧化安定性以及能降低NO_X的排放；而油脂不飽和脂肪酸含量高時(shí)，可獲得較高的低溫流動(dòng)性。因此，可以通過優(yōu)化培養(yǎng)基的組成，改變其碳氮源的組成、濃度來改變菌體油脂的組成含量，為進(jìn)一步生產(chǎn)出符合國(guó)標(biāo)的生物柴油提供優(yōu)質(zhì)的原料油脂。

所述發(fā)酵條件為：在25-31℃、140-160r/min條件下，以10-20%種子液濃度的接種量進(jìn)行接種，接種到發(fā)酵培養(yǎng)基中進(jìn)行發(fā)酵，發(fā)酵時(shí)間為120h。