[發明專利]激活腫瘤細胞內源性PD-1的試劑在制備抗腫瘤藥物中的用途

在審

• 申請號: 202110164143.6
• 申請日: 2021-02-05
• 公開（公告）號: CN112933239A
• 公開（公告）日: 2021-06-11
• 發明（設計）人: 王冬來;曹治杰;劉雅菁
• 申請（專利權）人: 中國醫學科學院基礎醫學研究所
• 主分類號: A61K45/06
• 分類號: A61K45/06;A61K31/496;A61K31/4745;A61K31/165;A61K31/455;A61P35/00;A61P35/02;C12N5/09
• 代理公司: 北京戈程知識產權代理有限公司 11314
• 代理人: 程偉;韓文華

本發明涉及激活腫瘤細胞內源性PD?1的試劑在制備抗腫瘤藥物中的用途。具體地，本發明涉及組蛋白去乙?；敢种苿┡c激活p53通路的抗腫瘤劑的組合在制備用于治療受試者的腫瘤的藥物中的用途。另一方面，本發明涉及一種用于體外增強腫瘤細胞內源性PD?1表達的方法，包括：1)在37℃恒溫細胞培養箱中培養腫瘤細胞1天；2)向步驟1)的腫瘤細胞中加入激活p53通路的抗腫瘤劑，將腫瘤細胞繼續培養18小時；和3)向步驟2)的腫瘤細胞中加入曲古柳菌素A和煙酰胺處理細胞6小時。

技術領域

本發明涉及藥物化學技術領域，具體提供一種靶向腫瘤細胞關鍵分子的聯合給藥方式。根據本發明的方法，可顯著提高腫瘤細胞內源性PD-1表達。

背景技術

最新全球癌癥數據顯示，全球癌癥死亡病例近千萬例，癌癥一直是人類生命的第一殺手。我國始終將國民生命安全和身體健康放在首位，重視科技和醫療發展。隨著科技和醫療衛生的不斷發展，癌癥治療已不局限于普通的手術、放療、化療或靶向治療。

近年來，免疫檢查點抑制劑PD-1/PD-L1的單克隆抗體免疫療法在臨床上取得顯著療效。在晚期黑色素瘤、肺癌、乳腺癌、皮膚癌和淋巴瘤等在內的近20種實體腫瘤中，PD-1/PD-L1單抗通過阻斷免疫細胞表面的PD-1受體和腫瘤細胞表面的PD-L1配體之間的相互作用，幫助免疫細胞中的T細胞恢復活力，從而殺傷癌細胞，實質性的改善了晚期腫瘤患者的生存期。但隨著臨床治療病例增加，患者間差異性很大，耐藥性、副作用或無應答逐漸明顯，這成為免疫療法的一大阻礙，因此，基于PD-1為靶點的治療方案亟需進一步完善。

近期研究發現，腫瘤細胞中也表達PD-1，并且以一種免疫非依賴的方式調控腫瘤細胞的生物學行為。在黑色素瘤細胞、肝癌細胞、胰腺癌細胞和肺癌細胞中，均發現腫瘤細胞內源性PD-1參與調控腫瘤細胞的增殖。由于腫瘤細胞內源性PD-1表達量極低，因此需要研發一種激活腫瘤細胞內源性PD-1的方法，為基于腫瘤細胞PD-1的治療方法提供新的用藥策略。

此外，研究發現在一些癌癥中組蛋白去乙?；?HDAC)水平明顯異常；HDAC可以去除組蛋白乙?；谷旧w更加緊密，從而抑制基因的轉錄。因此，HDAC抑制劑(HDACi)可以通過提高乙?；絹泶龠M基因表達以達到治療癌癥的效果。2006年FDA審批通過了默克爾公司研發的HDACi——伏立諾他——用于治療皮膚T淋巴細胞瘤。但HDACi的選擇性不強，因此多采用聯合其他腫瘤藥物的方式應用于腫瘤治療。

目前，仍然需要開發能有效治療腫瘤的組合藥物，其既可以靶向腫瘤，并且能夠有效增強目前抗腫瘤藥物的有效性。

發明內容

本發明是基于以下意想不到的發現：Nutlin-3A或喜樹堿(Camptothecin，CPT)與曲古柳菌素A(Trichostatin A，TSA)和煙酰胺(Nicotinamide，NAM)組合在體外處理腫瘤細胞后，可顯著增加腫瘤細胞內源性PD-1的表達，并有效地抑制腫瘤細胞的生長。

Nutlin-3A是Nutlin-3的活性異構體，為一種鼠雙微體2(MDM2)拮抗劑，抑制MDM2-p53相互作用，且穩定p53蛋白，因此誘導細胞周期停滯和細胞凋亡。

喜樹堿(Camptothecin，CPT)是從珙桐科落葉植物喜樹的種子或根皮中提出的一種生物堿，能直接破壞DNA結構，與DNA結合而使DNA易受內切酶的攻擊，同時抑制DNA聚合酶而影響DNA的復制，主要對增殖細胞敏感，為細胞周期特異性藥物，作用于S期，對G1、G2與M期細胞有輕微的殺傷力。

曲古柳菌素A(Trichostatin A，TSA)是一種組蛋白去乙酰化酶抑制劑(histonedeacetylase inhibitor，HDACi)。