[發明專利]一種高純度藻藍蛋白及其從螺旋藻中提取的方法

有效

• 申請號: 202110162085.3
• 申請日: 2021-02-05
• 公開（公告）號: CN112694529B
• 公開（公告）日: 2022-12-20
• 發明（設計）人: 楊南超
• 申請（專利權）人: 無錫定象改性硅膠材料有限公司
• 主分類號: C07K14/795
• 分類號: C07K14/795;C07K1/14;C07K1/34
• 代理公司: 武漢智慧恒知識產權代理事務所(特殊普通合伙) 42232
• 代理人: 彭沖

1.一種從螺旋藻中提取高純度藻藍蛋白的方法，其特征在于：包括以下步驟：

(1)螺旋藻破壁：將螺旋藻粉浸泡于氯化鈉溶液中，離心，得上清液；

(2)藻藍蛋白粗提純：向步驟(1)上清液中加入多功能化硅膠材料I，攪拌，過濾，取上清液，得藻藍蛋白粗提液；所述多功能化硅膠材料I的化學式為：[(O_3/2)Si(CH₂)_xS(CH₂)_yNH(CH₂CH₂NH)_zH]_a[Si(O_4/2)]_b[(CH₂)_uWSi(O_3/2)]_c；

其中，x是從2到12的整數；y是從3到12的整數；z是0到100的整數；u是從2到12的整數；W是SH或S(CH₂)_vSH，v是2到6的整數；a，b，c均為整數，且a+c：b的比例介于0.000001至100，a和b始終存在，當c大于零時，c與a+b的比介于0.000001至10；

(3)藻藍蛋白精提純：向步驟(2)上清液中加入多功能化硅膠材料II，攪拌，過濾，洗脫，干燥，得高純度藻藍蛋白；所述多功能化硅膠材料II的化學式為：[[(O_3/2)Si(CH₂)_xP(＝O)(OM)₂]_mFe_n]_a[Si(O_4/2)]_b[(CH₂)_uWSi(O_3/2)]_c[VSi(O_3/2)]_d；

其中，M是H、堿金屬、堿土金屬，x是從2到12的整數；u是從2到12的整數；W是SH或S(CH₂)_vSH，v是2到6的整數；V選自C_1-22-烷基、C_1-22-烷基芳基、芳基、C_2-20-烷基硫醚基、C_1-12烷基、C_2-20-亞烷基硫醚烷基、C_2-20-烷基硫醚芳基、C_2-20-亞烷基硫醚芳基；a，b，c，d，m，n均為整數，且a+c+d：b的比例介于0.000001至100，a和b均始終存在，當c或d或二者均大于零時，c+d與a+b的比例介于0.000001至100；m與n的比值介于100～0.01；

所述步驟(3)中的洗脫包括：

a.向過濾后的固體中加入0.005～0.01M磷酸緩沖液攪拌0.5～2h，固液比為1:50～1000g/ml，用200目濾布過濾，保留固體；

b.向步驟a所得固體中加入0.05～0.5M的磷酸緩沖液攪拌2～4h，固液比為1:1～10g/ml，用40目濾布過濾，保留液體；

c.對步驟a所得固體重復兩次步驟b，保留液體。

2.根據權利要求1所述的一種從螺旋藻中提取高純度藻藍蛋白的方法，其特征在于：所述步驟(1)為按固液比1：10～50g/ml，將螺旋藻粉加入0.01-0.1M氯化鈉溶液中浸泡2-8h，再以6000rpm的轉速離心30min。

3.根據權利要求1所述的一種從螺旋藻中提取高純度藻藍蛋白的方法，其特征在于：步驟(2)和步驟(3)中，所述多功能化硅膠材料I和所述多功能化硅膠材料II的粒徑均為200～500um，攪拌時間均為2～8h，攪拌溫度均為10～40℃，過濾所用濾布目數均為200目。

4.根據權利要求1所述的一種從螺旋藻中提取高純度藻藍蛋白的方法，其特征在于：步驟(2)和步驟(3)中，所述多功能化硅膠材料I和所述多功能化硅膠材料II與含藻藍蛋白液體的固液比均為：10～25g/L。