[發明專利]適用于雪茄煙不同組織基因表達分析的內參基因及其應用

有效

• 申請號: 202110156904.3
• 申請日: 2021-02-04
• 公開（公告）號: CN112813181B
• 公開（公告）日: 2022-07-26
• 發明（設計）人: 張慧;徐國云;周會娜;曹培健;張劍鋒;翟妞;劉萍萍;陳千思;鄭慶霞;金立鋒
• 申請（專利權）人: 中國煙草總公司鄭州煙草研究院
• 主分類號: C12Q1/6895
• 分類號: C12Q1/6895;C12N15/11
• 代理公司: 鄭州睿信知識產權代理有限公司 41119
• 代理人: 牛愛周

1.RPL14A基因或UBC27基因作為內參基因在qRT-PCR檢測雪茄煙不同組織基因轉錄表達水平中的應用；所述RPL14A基因的核苷酸序列如序列表中SEQ ID NO.1所示；所述UBC27基因的核苷酸序列如序列表中SEQ ID NO.2所示。

2.根據權利要求1所述的應用，其特征在于，采用核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示的正向引物和核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示的反向引物對RPL14A基因進行特異性擴增；或采用核苷酸序列如SEQ ID NO.5所示的正向引物和核苷酸序列如SEQ ID NO.6所示的反向引物對UBC27基因進行特異性擴增。

3.根據權利要求2所述的應用，其特征在于，所述qRT-PCR在20μL的反應體系中依次加入以下試劑：10 μL 2×SYBR I Master，上下游引物各0.5 μL，50 ng的cDNA，加ddH₂O至20μL。

4.根據權利要求2所述的應用，其特征在于，所述qRT-PCR的反應程序為：94 ℃預變性30 s；94 ℃變性5 s，60 ℃退火10 s，72 ℃延伸10 s，45個循環。