[發(fā)明專利]一種多視角的腫瘤組織病理切片及其制備方法

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202110149359.5
• 申請(qǐng)日: 2021-02-03
• 公開（公告）號(hào): CN112798381A
• 公開（公告）日: 2021-05-14
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 王飛;岳青芳;張媛;張璐
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 陜西省人民醫(yī)院
• 主分類號(hào): G01N1/28
• 分類號(hào): G01N1/28;G01N1/30;G01N1/36
• 代理公司: 北京科家知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 11427
• 代理人: 宮建華

1.一種多視角的腫瘤組織病理切片，所述病理切片能夠在X、Y、Z三個(gè)視角觀察腫瘤組織的形態(tài)，其特征在于，每個(gè)所述病理切片包括腫瘤組織、載玻片和對(duì)置分布的支撐蓋玻片和疊壓蓋玻片；所述腫瘤組織貼放于所述載玻片、所述支撐蓋玻片和所述疊壓蓋玻片之間；

所述腫瘤組織為柱體結(jié)構(gòu)，并且截面為不同夾角的V形；所述腫瘤組織的側(cè)表面能夠觀察到所述腫瘤組織順組織紋理和逆組織紋理的生長(zhǎng)特征；所述腫瘤組織每個(gè)部位的厚度均為4～6μm，并且每個(gè)部位的平整度保持一致；

所述支撐蓋玻片和所述疊壓蓋玻片依據(jù)所述腫瘤組織截面V形的夾角匹配有不同型號(hào)，能夠封裝不同夾角的所述腫瘤組織。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種多視角的腫瘤組織病理切片，其特征在于：所述腫瘤組織截面V形夾角的大小為90°～150°內(nèi)任一角度。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種多視角的腫瘤組織病理切片，其特征在于：所述支撐蓋玻片和所述疊壓蓋玻片的大小基本一致，所述支撐蓋玻片和所述疊壓蓋玻片為不同夾角的V形結(jié)構(gòu)。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種多視角的腫瘤組織病理切片，其特征在于：所述腫瘤組織的截面夾角與所述疊壓蓋玻片的夾角相等，并與所述疊壓蓋玻片的夾角互補(bǔ)為180°。

5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種多視角的腫瘤組織病理切片，其特征在于：所述腫瘤組織順組織紋理和逆組織紋理的中間分割線與所述疊壓蓋玻片的夾角線完全貼合，在所述疊壓蓋玻片的X-Z面和Y-Z面能清晰觀察腫瘤組織的組織紋理。

6.基于權(quán)利要求1-5中所述的任一一種多視角的腫瘤組織病理切片的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

S1、預(yù)處理：選取動(dòng)物的新鮮腫瘤組織，通過(guò)注射法或灌注法將固定液滲透至組織的內(nèi)部，選擇脫水劑置換固定后的組織中的水分，并使用透明劑進(jìn)行透明處理；

S2、浸蠟、包埋：石蠟浸入組織中以取代透明劑；將浸蠟的組織置于融化的固體石蠟中，石蠟?zāi)毯螅M織被包埋形成蠟塊；

S3、切片：修整蠟塊后，將蠟塊固定，使用豎直切片刀對(duì)蠟塊進(jìn)行切片，保證每次切片的間距為4～6μm，切片刀旋轉(zhuǎn)90°或120°或150°繼續(xù)切片，實(shí)現(xiàn)腫瘤組織順組織紋理和逆組織紋理的切片；

S4、貼片：將切片后的組織薄片按照編號(hào)依次貼片于載玻片和支撐蓋玻片上；

S5、脫蠟：選擇二甲苯多次處理組織薄片后，再加入不同濃度的乙醇，并通過(guò)流水沖洗；

S6、染色、封片：使用蘇木素-伊紅染色法對(duì)組織薄片進(jìn)行染色，吹干后加入支撐蓋玻片并封片。

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的一種多視角的腫瘤組織病理切片的制備方法，其特征在于：在所述S1中，所述脫水劑為不同濃度的乙醇溶液，脫水處理分別進(jìn)行80%、90%、95%、100%乙醇濃度的梯度脫水，每個(gè)梯度的脫水處理時(shí)間為2.5-3h，脫水處理通過(guò)人工完成或脫水機(jī)自控完成。

8.根據(jù)權(quán)利要求6所述的一種多視角的腫瘤組織病理切片的制備方法，其特征在于：在所述S1中選擇固定液10%甲醛固定液或95%乙醇固定液，所述腫瘤組織與固定液的比例為1:4～20，處理時(shí)間為36h。

9.根據(jù)權(quán)利要求6所述的一種多視角的腫瘤組織病理切片的制備方法，其特征在于：在所述S2中，浸蠟處理中使用的石蠟硬脂酸混合試劑和組織的體積比例大于20:1。

10.根據(jù)權(quán)利要求6所述的一種多視角的腫瘤組織病理切片的制備方法，其特征在于：在所述S6中，蘇木素-伊紅染色法為5％的蘇木素3-5min，1％的鹽酸10-20s，伊紅10-20s，每次過(guò)程都要經(jīng)過(guò)流水3min。