[發明專利]慢病毒貼壁細胞培養工藝在審
| 申請號： | 202110146692.0 | 申請日： | 2021-02-03 |
| 公開（公告）號： | CN112779226A | 公開（公告）日： | 2021-05-11 |
| 發明（設計）人： | 胡迪超;馬紅;隋禮麗;孔令潔 | 申請（專利權）人： | 蘇州博騰生物制藥有限公司 |
| 主分類號： | C12N7/00 | 分類號： | C12N7/00;C12N5/071 |
| 代理公司： | 蘇州新知行知識產權代理事務所(特殊普通合伙) 32414 | 代理人： | 陳勐哲 |
| 地址： | 215000 江蘇省蘇州市*** | 國省代碼： | 江蘇;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 病毒 細胞培養 工藝 | ||
【權利要求書】：
1.一種慢病毒貼壁細胞培養工藝，其特征在于：其包括以下步驟：
S1將HEK293T細胞在裝有VP-SFM培養基和低濃度的胎牛血清的培養裝置中進行適應性馴化培養；
S2步驟S1馴化培養良好的HEK293T細胞建立細胞庫；
S3將對數生長期的HEK293T細胞接種至細胞工廠；
S4 在四質粒系統中，對HEK293T細胞進行轉染；
S5轉染50～100h后，收獲細胞培養上清液，即可獲得細胞活力達85%以上、轉染上清滴度5×106 TU/mL以上的慢病毒細胞。
2.根據權利要求1所述的慢病毒貼壁細胞培養工藝，其特征在于：所述的步驟S1中，胎牛血清的濃度為0.5%～1.5%。
3.根據權利要求1所述的慢病毒貼壁細胞培養工藝，其特征在于：所述的步驟S3中，HEK293T細胞接種至細胞工廠時的細胞接種密度為2×104～6×104/cm2。
4.根據權利要求1所述的慢病毒貼壁細胞培養工藝，其特征在于：步驟S3中的細胞工廠為Nunc的CF-2細胞工廠。
5.根據權利要求1所述的慢病毒貼壁細胞培養工藝，其特征在于：步驟S4中，使用PEIpro法轉染HEK293T細胞，PEIpro:DNA按1：1進行轉染。
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