[發明專利]一種淡紫擬青霉用液體培養基及淡紫擬青霉菌劑制備方法

有效

• 申請號: 202110143352.2
• 申請日: 2021-02-02
• 公開（公告）號: CN112680366B
• 公開（公告）日: 2023-01-31
• 發明（設計）人: 于曉斌;程志強;高峰;趙春莉;劉文叢;楊桂霞
• 申請（專利權）人: 吉林農業大學
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;C12N3/00;C12R1/79
• 代理公司: 吉林省中玖專利代理有限公司 22219
• 代理人: 姜姍姍

本發明提供了一種淡紫擬青霉用液體培養基及淡紫擬青霉菌劑制備方法，是將菌糠、水、氯化鋅和硝酸鈉混勻后經高壓蒸汽滅菌得到，每克菌糠中加入水6?8毫升，每克菌糠中加入氯化鋅0.04?0.06g，每克菌糠中加入硝酸鈉0.08?0.12g，再將淡紫擬青霉接種液接入液體培養基中，在27～31℃培養4～6d后收獲淡紫擬青霉菌劑。本發明原材料為農業廢料，經濟易得，培養方法操作簡單，生產成本較低，產孢量高。

技術領域

本發明屬于發酵培養技術領域，尤其涉及一種淡紫擬青霉用液體培養基及淡紫擬青霉菌劑制備方法。

背景技術

淡紫擬青霉 （Paecilomyces lilacinus）是一種廣泛分布于土壤和植物根系的習居菌，被認為是最有前途的防治植物線蟲病的生物介質。其具有高效、光譜、長效、安全、無污染、無殘留等特點。淡紫擬青霉能夠寄生植物線蟲的卵、幼蟲及成蟲，侵染過程中通過菌絲機械壓力和分泌的胞外酶聯合作用，使線蟲和蟲體破裂而死，而且在代謝過程中能夠產生具有殺線蟲活性的物質，抑制線蟲卵的孵化，并強烈抑殺 2 齡幼蟲從而控制作物線蟲病害。此外，淡紫擬青霉還能產生促進植物生長的生物活性物質。因此，淡紫擬青霉在植物線蟲病的生物防治上具有巨大的潛力。

淡紫擬青霉經濟、快速大量增殖生產是淡紫擬青霉大量用于生物防治實踐的前提條件。目前國內外學者嘗試使用當地農業廢料進行淡紫擬青霉的培養，并且得到了孢子數量可觀的淡紫擬青霉。

菌糠是指食用菌栽培采收后的培養基剩余物，若將其進行利用，可以達到變廢為寶的效果。作為一種農業生產中的廢棄物，其主要組成為食用菌菌絲體，纖維素含量約10%-30%，粗蛋白含量約6%-13%，粗脂肪含量約1%-3%。如若不及時處理利用，還會造成資源浪費和環境污染。研究發現，廢棄的菌糠中的營養物質可以作為作物的養料，也可以用來培養其他食用菌。

發明內容

本發明的目的是提供一種淡紫擬青霉用液體培養基，實現快速生產淡紫擬青霉，其是將菌糠、水、氯化鋅和硝酸鈉混勻后經高壓蒸汽滅菌得到，每克菌糠中加入水6-8毫升，每克菌糠中加入氯化鋅0.04-0.06g，每克菌糠中加入硝酸鈉0.08-0.12g。

作為本發明更優的技術方案，所述的菌糠為以木屑為基質的木耳菌糠、平菇菌糠或滑子蘑菌糠。

作為本發明更優的技術方案，所述的每克菌糠中加入水6毫升，每克菌糠中加入氯化鋅0.05g，每克菌糠中加入硝酸鈉0.10g。

作為本發明更優的技術方案，所述的高壓蒸汽溫度為121℃，水蒸汽壓力為0.11MPa。

作為本發明更優的技術方案，所述的高壓蒸汽滅菌時間30min。

本發明還有一個目的是提供一種淡紫擬青霉菌劑制備方法，生產成本較低并且周期較短，具體如下：將淡紫擬青霉接種液接入淡紫擬青霉用液體培養基，按每克干菌糠加入接種液0.14-0.28ml，密封后在25-27°C搖床中以150rpm速度培養4-6d后收獲淡紫擬青霉菌劑。

作為本發明更優的技術方案，按每克干菌糠加入接種液0.07ml。

作為本發明更優的技術方案，所述的淡紫擬青霉接種液通過沖洗長有淡紫擬青霉的平板得到，所述的淡紫擬青霉平板的制備過程為將淡紫擬青霉菌塊使用無菌操作放置在裝有滅菌PDA培養基的平板培養皿中，放置在29℃培養箱中培養7-10天后收獲。

有益效果如下：

本發明中的液體發酵所需時間為6天，得到的孢子量濃度為1.24×10¹⁰，而常見的固體發酵時間大體都在8-10天，得到的孢子量濃度達到0.1×10¹⁰左右。