[發(fā)明專利]一種白僵菌用液體培養(yǎng)基及白僵菌菌劑制備方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202110143160.1
• 申請日: 2021-02-02
• 公開（公告）號: CN112680365B
• 公開（公告）日: 2023-01-31
• 發(fā)明（設計）人: 程志強;于曉斌;趙春莉;劉文叢;高峰
• 申請（專利權）人: 吉林農業(yè)大學
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;C12N3/00;C12R1/645
• 代理公司: 吉林省中玖專利代理有限公司 22219
• 代理人: 姜姍姍

本發(fā)明提供了一種白僵菌用液體培養(yǎng)基及白僵菌菌劑制備方法，實現(xiàn)快速生產白僵菌，其是將菌糠、水、硫酸錳和硝酸銨混勻后經高壓蒸汽滅菌得到，每克菌糠中加入水4～5ml，每克菌糠中加入硫酸錳0.03～0.05g，每克菌糠中加入硝酸銨0.05～0.1g。將濃度為10⁷孢子/ml的白僵菌接種液接入白僵菌用液體培養(yǎng)基，按每克干菌糠加入接種液0.05～0.10ml，密封后在25～27℃搖床中以150rpm速度培養(yǎng)4～6d后收獲白僵菌菌劑，本發(fā)明產孢量高，生產成本較低。

技術領域

本發(fā)明屬于發(fā)酵培養(yǎng)技術領域，尤其涉及一種白僵菌用液體培養(yǎng)基及白僵菌菌劑制備方法。

背景技術

白僵菌是一種子囊菌類的真菌，能夠在自然條件通過體壁接觸感染殺死害蟲。其可寄生15個目149個科的700余種昆蟲，對人畜和環(huán)境比較安全、害蟲一般不易產生抗藥性、可與某些化學農藥(殺蟲劑、殺螨劑、殺菌劑)同時使用。至今為止，白僵菌在國際上已有17種產品注冊登記，用于防治蠐螬、家蠅、介殼蟲、白粉虱、蚜蟲、薊馬、馬鈴薯葉甲、蜚蠊、蝗蟲、蚱蜢、蟋蟀、棉鈴象、棉跳盲蝽、玉米螟、天牛、甘蔗金龜子等害蟲。白僵菌高孢粉是國家林業(yè)局推廣的高效生物殺蟲劑之一，可廣泛應用于森林害蟲，蔬菜害蟲，旱地農作物害蟲等。多年來，國內應用白僵菌對近40種農林害蟲防治成功，如今在生產中使用的主要有:松毛蟲、玉米螟、蠐螬、蝗蟲、馬鈴薯甲蟲、松褐天牛、白蟻、茶小綠葉蟬、桃小食心蟲等。白僵菌防治最成功的是苗圃、草坪、農田等的蠐螬，蠐螬危害花生、大豆、草坪、蔬菜、苗圃等多種作物。在有機農產品、茶葉生產中廣泛應用。

白僵菌經濟、快速大量增殖生產是白僵菌大量用于生物防治實踐的前提條件。目前國內外學者嘗試使用當?shù)剞r業(yè)廢料進行白僵菌的培養(yǎng)，并且得到了孢子數(shù)量可觀的白僵菌。菌糠是指食用菌栽培采收后的培養(yǎng)基剩余物，作為一種農業(yè)生產中的廢棄物，其主要組成為食用菌菌絲體，纖維素含量約10％-30％，粗蛋白含量約6％-13％，粗脂肪含量約1％-3％。如若不及時處理利用，還會造成資源浪費和環(huán)境污染。研究發(fā)現(xiàn)，廢棄的菌糠中的營養(yǎng)物質可以作為作物的養(yǎng)料，也可以用來培養(yǎng)其他食用菌。若將其進行利用，可以達到變廢為寶的效果。

發(fā)明內容

本發(fā)明的目的是提供一種白僵菌用液體培養(yǎng)基，實現(xiàn)快速生產白僵菌，其是將菌糠、水、硫酸錳和硝酸銨混勻后經高壓蒸汽滅菌得到，每克菌糠中加入水4～5ml，每克菌糠中加入硫酸錳0.03～0.05g，每克菌糠中加入硝酸銨0.05～0.1g。

作為本發(fā)明更優(yōu)的技術方案，所述的菌糠為以木屑為基質的木耳菌糠、平菇菌糠、滑子蘑菌糠中的一種或是幾種。

作為本發(fā)明更優(yōu)的技術方案，所述的每克菌糠中加入水4ml，每克菌糠中加入硫酸錳0.03g，每克菌糠中加入硝酸銨0.05g。

作為本發(fā)明更優(yōu)的技術方案，所述的高壓蒸汽溫度為121℃，水蒸汽壓力為0.11MPa。

作為本發(fā)明更優(yōu)的技術方案，所述的高壓蒸汽滅菌時間30min。

本發(fā)明還有一個目的是提供一種白僵菌菌劑制備方法，生產成本較低并且周期較短，實現(xiàn)白僵菌大量培養(yǎng)，具體步驟如下：將白僵菌接種液接入白僵菌用液體培養(yǎng)基，按每克干菌糠加入接種液0.05～0.10ml，密封后在25～27℃搖床中以150rpm速度培養(yǎng)4～6d后收獲白僵菌菌劑。

作為本發(fā)明更優(yōu)的技術方案，按每克干菌糠加入接種液0.10ml。

作為本發(fā)明更優(yōu)的技術方案，所述的白僵菌接種液通過沖洗長有白僵菌的平板得到，所述的白僵菌平板的制備過程包括:將白僵菌菌塊使用無菌操作放置在裝有滅菌PDA培養(yǎng)基的平板培養(yǎng)皿中，放置在29℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)7-10天后收獲。

有益效果如下：