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[發明專利]與小麥根腐平臍蠕孢黑胚病抗性QTL緊密連鎖的分子標記及其應用有效

專利信息
申請號: 202110138132.0 申請日: 2021-02-01
公開(公告)號: CN112746123B 公開(公告)日: 2023-05-26
發明(設計)人: 李巧云;殷貴鴻;唐建衛;姜玉梅;王絲雨;高闖;高艷 申請(專利權)人: 河南農業大學
主分類號: C12Q1/6895 分類號: C12Q1/6895;C12N15/11
代理公司: 鄭州大通專利商標代理有限公司 41111 代理人: 張立強
地址: 450002 河*** 國省代碼: 河南;41
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摘要:
搜索關鍵詞: 麥根 腐平臍蠕孢黑胚病 抗性 qtl 緊密 連鎖 分子 標記 及其 應用
【權利要求書】:

1.鑒定小麥根腐平臍蠕孢黑胚病抗性的方法,其特征在于,以小麥植株葉片DNA為模板,SEQ?ID?NO:2和SEQ?ID?NO:3所示序列為引物對進行PCR擴增,將擴增產物用內切酶HaeIII進行酶切,然后將酶切產物進行質量分數為8%聚丙烯酰胺凝膠電泳分離,若電泳產物存在大小為249bp的DNA片段,則預測該小麥植株具有根腐平臍蠕孢黑胚病抗性;所述的小麥植株為抗病小麥品系豫優1號、以及以抗病小麥品系豫優1號為父本與其它小麥品系雜交后自交至F5~F7的重組自交系群體或者回交得到的BC1群體。

2.根據權利要求1所述的方法,其特征在于,所述PCR擴增程序為:94℃預變性5?min;94℃變性30?s、60℃退火30?s和72℃延伸30s,35個循環;最后72℃延伸5?min,獲得擴增產物。

3.根據權利要求1所述的方法,其特征在于,酶切體系:10?μL體系,其中包括:0.5?μL、10?U/μL的HaeIII酶,1.0?μL的10×M型酶切緩沖液,1.0?μL的PCR擴增產物,7.5?μL的ddH2O;37.0℃,酶切1?h,獲得酶切產物。

4.根據權利要求1所述的方法,其特征在于,所述質量分數為8%聚丙烯酰胺凝膠的制備方法如下:每100mL聚丙烯酰胺膠溶液中加入有7.7?g丙烯酰胺和0.3?g甲叉雙丙烯酰胺。

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