[發明專利]一種杜仲京尼平苷酸復合納米顆粒的制備方法

有效

• 申請號: 202110134102.2
• 申請日: 2021-01-28
• 公開（公告）號: CN112999161B
• 公開（公告）日: 2023-07-07
• 發明（設計）人: 王志宏;彭密軍;楊秋玲;黃韜
• 申請（專利權）人: 廣東省科學院測試分析研究所（中國廣州分析測試中心）
• 主分類號: A61K9/14
• 分類號: A61K9/14;A61K47/42;A61K47/36;A61K31/7048;A61P39/06
• 代理公司: 廣州科粵專利商標代理有限公司 44001
• 代理人: 蔣歡妹;莫瑤江

本發明公開了一種杜仲京尼平苷酸復合納米顆粒的制備方法，利用玉米醇溶蛋白獨特的自組裝特性，以多糖作為穩定劑，利用反溶劑共沉淀法制得玉米醇溶蛋白荷載京尼平苷酸復合納米顆粒，操作簡單、條件溫和、成本較低、綠色環保，將京尼平苷酸包埋于蛋白納米顆粒中，有效的增加其穩定性，改善其溶解度，所制的玉米醇溶蛋白荷載京尼平苷酸復合納米顆粒粒徑均勻，包埋率高，穩定性較好，提高了天然活性成分京尼平苷酸的生物利用率，解決了京尼平苷酸不穩定性和難溶解問題。

技術領域：

本發明涉及醇溶蛋白納米顆粒技術領域，具體涉及一種杜仲京尼平苷酸復合納米顆粒的制備方法。

背景技術：

京尼平苷酸(Geniposidic?acid，GPA)是杜仲皮、葉和雄花中一種重要的天然活性物質，但是由于溶解度和穩定性的影響，在實際應用中往往會受到限制，很大程度影響其生物利用率。將天然的活性成分包埋至納米級顆粒中是目前解決這一問題常用的方法。該方法可以保護不穩定活性成分在復雜環境中不被降解，將不溶于水的活性成分均勻的分散于水相中，改善活性成分的生物利用度。目前用于包埋天然活性成分的材料大多是來源于天然、安全以及易得的生物材料。天然生物材料具有優越的生物相容性和營養價值。蛋白質基納米顆粒由于可以改善其穩定性和溶解性，所以可顯著提升活性成分的生物利用度。玉米醇溶蛋(Zein)白作為玉米中的主要貯藏蛋白，含量可達50％～60％。Zein屬于一種天然的蛋白質，具有良好的生物相容性和可降解性，被認為是安全的食品原料。Zein的結構與其理化特性和自組裝機制緊密相關。玉米醇溶蛋白由于其高疏水性特性，自組裝形成的膠體顆粒可作為包埋與遞送活性物質的載體。玉米醇溶蛋白具有良好的生物相容性、自組裝特性，被廣泛應用在生物醫藥領域、納米輸送領域以及食品表面涂膜等領域。而且玉米醇溶蛋白在胃液中不易被消化，因此常用于運載基質包埋活性成分和營養物質，可以抵抗胃部強酸環境及各種酶的作用，使藥物等在吸收位點緩釋，達到靶向輸送的目的。

反溶劑法快速簡便，制備粒子粒徑較小，且對設備要求較低，能耗較少，是目前實驗室制備納米顆粒的主要方法。在反溶劑過程中，溶劑和反溶劑的比例、混合速度以及溶液濃度等因素都會影響反溶劑的效果，此外，反溶劑法制備的納米粒子在細胞粘附性，組織滲透性，延長消化到停留時間以及提高生物利用率，而且比微膠囊在這些方面具有明顯的優勢。

發明內容：

本發明的目的是提供一種杜仲京尼平苷酸復合納米顆粒的制備方法，利用玉米醇溶蛋白獨特的自組裝特性，以多糖作為穩定劑，利用反溶劑共沉淀法制得玉米醇溶蛋白荷載京尼平苷酸復合納米顆粒，操作簡單、條件溫和、成本較低、綠色環保，將京尼平苷酸包埋于蛋白納米顆粒中，有效的增加其穩定性，改善其溶解度，所制的玉米醇溶蛋白荷載京尼平苷酸復合納米顆粒粒徑均勻，包埋率高，穩定性較好，提高了天然活性成分京尼平苷酸的生物利用率，解決了京尼平苷酸不穩定性和難溶解問題。

本發明是通過以下技術方案予以實現的：

一種杜仲京尼平苷酸復合納米顆粒的制備方法，包括以下步驟：取玉米醇溶蛋白溶解于乙醇溶液，充分攪拌，完全溶解，加入京尼平苷酸，京尼平苷酸與玉米醇溶蛋白的質量比為1︰20～1︰100，在密閉環境中繼續攪拌，直至澄清；加入多糖溶液，去離子水與玉米醇溶蛋白的體積比為5︰1～30︰1，玉米醇溶蛋白與多糖的質量比為15︰1～1︰15，室溫攪拌均勻，通過減壓濃縮去除乙醇，離心去除不溶物，調節pH為4，所得樣品經真空冷凍干燥,，得到玉米蛋白荷載京尼平苷酸的復合納米顆粒。

乙醇溶液體積分數為60％～80％(V/V)。所述京尼平苷酸溶液的pH為5～7。

攪拌為磁力攪拌，轉速為1000-2000rpm，攪拌時間為0.5～2.0h。

所述多糖包括殼聚糖、阿拉伯膠、果膠和卡拉膠。

減壓濃縮采用旋轉蒸發，溫度為40～50℃，轉速40-80rpm。

所述真空冷凍干燥的條件為預冷時間6～12h，預冷溫度-20～-40℃，冷凍干燥溫度為-40～-60℃，冷凍時間為24～72h。