[發(fā)明專利]一種鉆喙蘭屬SSR分子標(biāo)記引物組合物及其應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202110130207.0
• 申請日: 2021-01-29
• 公開（公告）號: CN112662806B
• 公開（公告）日: 2021-07-30
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 肖文芳;李佐;呂復(fù)兵;陳和明;朱根發(fā)
• 申請（專利權(quán)）人: 廣東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院環(huán)境園藝研究所
• 主分類號: C12Q1/6895
• 分類號: C12Q1/6895;C12Q1/6858;C12N15/11;A01H1/04
• 代理公司: 北京精金石知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11470
• 代理人: 尉月麗

本發(fā)明提供了一種鉆喙蘭屬SSR分子標(biāo)記引物組合物、指紋碼及其在鉆喙蘭屬種質(zhì)資源鑒定中的應(yīng)用，屬于分子生物學(xué)技術(shù)領(lǐng)域。本發(fā)明提供了鉆喙蘭屬13個(gè)SSR分子標(biāo)記擴(kuò)增引物組合物，并利用TP?M13?SSR技術(shù)對屬內(nèi)3個(gè)種10份不同的種質(zhì)資源進(jìn)行遺傳多樣性的分析及分子身份證的構(gòu)建，可準(zhǔn)確、高效、穩(wěn)定地鑒定鉆喙蘭屬種質(zhì)資源，為鉆喙蘭屬的種質(zhì)資源鑒定、親緣關(guān)系分析、性狀基因的定位、分子標(biāo)記輔助育種及鉆喙蘭屬相關(guān)的分子研究等奠定了基礎(chǔ)。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及分子生物學(xué)技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種鉆喙蘭屬SSR分子標(biāo)記引物組合物、指紋碼及其在鉆喙蘭屬種質(zhì)資源鑒定中的應(yīng)用。

背景技術(shù)

鉆喙蘭屬(RhynchostylisBlume)是隸屬蘭科、蘭亞科、萬代蘭族、指甲蘭亞族的一類單軸生長型附生蘭花，具花多且密的總狀花序，因此又得名狐貍尾蘭，主要分布于我國的云南省、貴州省和海南島，以及印度、斯里蘭卡和東南亞各國。鉆喙蘭屬植物株型緊湊、花繁色艷且絕大多數(shù)具濃烈芳香，栽培管理簡單，耐熱性強(qiáng)且易雜交，具有很高的觀賞價(jià)值和開發(fā)應(yīng)用前景。從19世紀(jì)中葉開始，就陸續(xù)有鉆喙蘭屬的種間雜交種、與近源蘭科植物之間的屬間雜交種在英國皇家園藝學(xué)會進(jìn)行登錄，截止2020年11月鉆喙蘭屬原生種登錄的F1代雜交組合已達(dá)381個(gè)。

除傳統(tǒng)雜交育種工作外，鉆喙蘭屬植物相關(guān)研究較少，目前主要集中在組培快繁、栽培管理和野生資源分布及鑒定等方面。莫饒等(2009)研究發(fā)現(xiàn)海南鉆喙蘭(Rhy.gigantea)的核型公式為2n＝2x＝36m+2sm(莫饒,等.蘭科11屬14種植物核型分析.云南植物研究,2009,31(6):504-508)。顏平等(2014)利用SRAP標(biāo)記技術(shù)分析了來自海南島22個(gè)居群地的144份海南鉆喙蘭野生資源的遺傳多樣性(顏平,等.基于SRAP標(biāo)記的海南鉆喙蘭種質(zhì)資源遺傳多樣性分析.熱帶作物學(xué)報(bào),2014,35(9):1677-1682)。JunitaKurniawati等(2019)利用2個(gè)RAPD引物對包括鉆喙蘭(Rhy.retusa)在內(nèi)的9個(gè)不同的蘭科原生種進(jìn)行了遺傳相似性分析，發(fā)現(xiàn)種內(nèi)相似性遠(yuǎn)高于種間的相似性(JunitaKurniawati,etal.Molecular Identification of Several Orchid Species Based on OPA10 andOPA18 RAPD Marker.Journal of Physics:Conference Series,2019,1397(1):012042)。Atsushi Matsuba等(2015)構(gòu)建了包含10600個(gè)BAC克隆的立梗藍(lán)狐尾(Rhy.coelestis)人工細(xì)菌染色體(Atsushi Matsuba,etal.Molecular cytogenetic use of BAC clones inNeofinetia falcate and Rhynchostylis coelestis.Nucleus,2015,58(3):207-210)。Subhas Chandra Roy等(2017)利用ddRAD技術(shù)對包括鉆喙蘭(Rhy.retusa)在內(nèi)的4個(gè)蘭花原生種進(jìn)行簡化基因組測序和遺傳多樣性分析(Subhas Chandra Roy,etal.Assessmentof genetic diversity among four orchids based on ddRAD sequencing data forconservation purposes.Physiology and Molecular Biology of Plants,2017,23(1):169-183)。