[發明專利]用于鑒定揚麥16及其衍生品種灌漿速率的KASP引物組及應用

有效

• 申請號: 202110129176.7
• 申請日: 2021-01-29
• 公開（公告）號: CN112708691B
• 公開（公告）日: 2022-05-20
• 發明（設計）人: 高德榮;胡文靜;朱冬梅;陸成彬;蔣正寧;王慧;王君嬋
• 申請（專利權）人: 江蘇里下河地區農業科學研究所
• 主分類號: C12Q1/6895
• 分類號: C12Q1/6895;C12Q1/6858;C12N15/11
• 代理公司: 江蘇圣典律師事務所 32237
• 代理人: 楊文晰

本申請公開一種用于鑒定揚麥16及其衍生品種灌漿速率的KASP引物組及應用，該KASP引物組包括核苷酸序列如SEQIDNO.1所示的引物1，核苷酸序列如SEQIDNO.2所示的引物2，核苷酸序列如SEQIDNO.3所示的引物3；該KASP引物組可用于PCR檢測揚麥16及其衍生品種的灌漿速率，該PCR檢測方法快速而直觀獲得小麥品種灌漿快慢結果，適用于大規模育種篩查，可以有效提高小麥雜交育種早世代灌漿速率選擇的有效性，結果直觀，縮短育種時間。

技術領域

本申請涉及小麥育種領域，特別是一組用于鑒定揚麥16及其衍生品種灌漿速率的KASP引物組及其應用。

背景技術

長江中下游麥區是我國最大的稻麥輪作區，稻麥總產量占全國的1/3以上。上世紀90年代開始，該麥區水稻機插秧和直播面積不斷擴大，造成水稻收獲期不斷推遲，導致小麥播期逐步推遲。小麥遲播一方面導致冬前生長嚴重不足，不利于形成壯苗和大穗，另一方面導致灌漿期縮短，粒重降低，同時增加灌漿期遭遇高溫的風險，最終產量下降，一般減產750～900kg·hm^-2，嚴重遲播田塊減產超過30％。因此，培育和種植籽粒灌漿速率高的小麥品種，是解決當前生產上粒重下降、產量降低等問題的主要手段之一。

灌漿速率是指每天每千粒小麥干物質的增長量，一般以“克”表示；若以每天每粒小麥干物質的增長量就以“毫克”表示。灌漿速率目前主要采用大田檢測；每個品種種一個小區，每個小區在開花期選擇開花時期、穗型大小一致且無病蟲害的單穗50個，掛牌標記，花后10天開始取樣，以后每隔5天在固定時間取樣1次，直至收獲。每次每個小區取10個單穗，剝取籽粒，在105℃下烘30分鐘殺青，80℃烘16小時～18小時至恒重，稱重計數，折算成千粒重。灌漿速率用每天每粒小麥增長重量表示，單位為毫克·(粒·天)^-1(參見文獻：“王文文,蘭進好,田紀春.小麥籽粒灌漿速率及粒重QTL初步研究[J].中國農學通報,2012,28(36):63-70.”；“苗永杰,閻俊,趙德輝,等.黃淮麥區小麥主栽品種粒重與籽粒灌漿特性的關系[J].作物學報,2018,44(2):260-267.”；“朱冬梅,王慧,劉大同,等.小麥籽粒灌漿與脫水特性研究[J].中國農業科學,2019,52(23):4251-4261.”)。而現有方法存在如下弊病：(1)受環境影響較大，自然條件下遇到高溫或者陰雨天氣時取樣時間無法固定，易造成工作量較大，來不及取樣。(2)一開始雖然選擇了開花時期、穗型大小一致且無病蟲害的單穗50個，掛牌標記，但是小麥的病害在整個生育期均會發生，灌漿期間會有赤霉病等穗部病害，一旦感染，嚴重影響籽粒重量，造成無法準確測定和計算灌漿速率。因此，通過人工測定上述表型(每天每粒小麥增長重量)計算灌漿速率的可靠性、穩定性、時效性和準確性低。

揚麥16是江蘇省主推的優質高產抗病中筋小麥主栽品種，是以當地品種揚麥158優系(91F138)為母本，揚90-30為父本，采用大群體目標性狀優先選擇的方法而成。揚麥16具有耐遲播、早熟、灌漿速度快等特點，以該品種為親本已經育成了一批適于長江中下游麥區種植的小麥新品種，是我國小麥育種的重要親本，揚麥16的衍生品種主要包括揚麥16、揚麥23、揚麥26、揚麥28、農麥126、農麥156和江豐麥1號等。其中2006年以來通過國家或江蘇省審定的品種已達至少12個。揚麥16作為新一代骨干親本，對選育耐遲播、早熟、灌漿速度快小麥新品種具有重要的價值。然而在育種中，親本之一的性狀在后代不斷的人工和環境的選擇中不一能穩定遺傳，故必須經過檢測后代是否攜帶親本優良性狀的基因型才能判斷揚麥16及其衍生品種與其他親本雜交后代的灌漿速率高低。通過選擇特異性引物并將其應用于揚麥16及其衍生品種為親本之一的灌漿速率分子標記選擇育種中，可以有效提高小麥雜交育種早世代灌漿快慢選擇的有效性。目前，針對揚麥16及衍生品種灌漿速率檢測的引物尚未見報道。

發明內容