[發明專利]一種二裂酵母發酵產物濾液的制備方法

有效

• 申請號: 202110114687.1
• 申請日: 2021-01-28
• 公開（公告）號: CN112708582B
• 公開（公告）日: 2022-11-15
• 發明（設計）人: 林澤森;潘科良;黃勇;付國海;蘇煥鑫
• 申請（專利權）人: 廣州市玉鑫化妝品有限公司
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;A61K8/99;A61Q19/02;A61Q19/08;C12R1/01
• 代理公司: 廣州一銳專利代理有限公司 44369
• 代理人: 甘奎強;董云

1.二裂酵母發酵產物濾液在制備黑色素生成抑制劑或在制備具有自由基清除作用的產品中的應用，其特征在于，所述的二裂酵母發酵產物濾液的制備方法，包含以下步驟：

S1、將雙歧桿菌接種到培養基上，28℃下進行活化培養2d，得到活化的雙歧桿菌，將活化的雙歧桿菌接種到液體培養基中，30℃下發酵培養3d，得到雙歧桿菌液；

S2、按照重量份配比稱取：0.012份復合維生素B、0.02份氯化鈉、0.05份硫酸鎂、0.16份脫脂乳粉、0.25份磷酸氫二鉀、0.28份氯化鐵、0.28份蛋白胨、0.3份酵母粉、0.4份水蘇糖、0.6份葡萄糖、0.64份十二水合磷酸氫二鈉、96.7份去離子水加入到發酵罐中，32℃下發酵24h，得到一次發酵液；

S3、將雙歧桿液接種于發酵液中，接種量為8wt%，在30℃下發酵40h，得到二次發酵液；

S4、將二次發酵液加入到無水乙醇中，500W超聲處理30min，離心，過濾，經過巴氏殺菌，濾液即為二裂酵母發酵產物濾液；所述二次發酵液、無水乙醇重量比為1：4；

S5、將二裂酵母發酵產物濾液加入到去離子水中，上大孔吸附樹脂，洗脫速度為1.5BV/h，去離子水洗 1.5BV，50wt％乙醇溶液洗2BV，收集乙醇洗液，干燥，即得純化的二裂酵母發酵產物濾液；

所述大孔吸附樹脂為HPD-600；

所述二裂酵母發酵產物濾液、去離子水重量比為5：1；

用于活化培養雙歧桿菌的培養基按重量百分比包括：0.2%磷酸氫二鉀，0.5%L-谷氨酸鈉，0.6％氯化鈉，0.8%木醋液，1%秸稈粉，1.5％葡萄糖，2％甘蔗糖蜜，余量純凈水；

所述液體培養基按重量百分比包括：0.2%磷酸氫二鉀，0.5%L-谷氨酸鈉，0.6％氯化鈉，0.8%木醋液，1%秸稈粉，1.5％葡萄糖，2％甘蔗糖蜜，余量純凈水；

所述雙歧桿菌為乳雙歧桿菌BB-12。