[發明專利]一種炭疽抗體雙孔快速檢測卡及檢測方法

在審

• 申請號: 202110113204.6
• 申請日: 2021-01-27
• 公開（公告）號: CN112881686A
• 公開（公告）日: 2021-06-01
• 發明（設計）人: 章健;張朝輝;塔英;岳建國;陳弟詩;王澤洲;周伯任;吳俊清;李明偉;吳冠英
• 申請（專利權）人: 成都微瑞生物科技有限公司;杭州微瑞科技有限公司
• 主分類號: G01N33/569
• 分類號: G01N33/569;G01N33/558;G01N33/58
• 代理公司: 成都瑞創華盛知識產權代理事務所(特殊普通合伙) 51270
• 代理人: 鄧瑞;辜強

本發明公開了一種炭疽抗體雙孔快速檢測卡及檢測方法，包括安裝在外殼內的PVC底板、吸水墊、硝酸纖維素膜、標記物墊、樣品墊、濾物墊和稀釋墊，所述硝酸纖維素膜固定在PVC底板上，在硝酸纖維素膜左端搭接吸水墊，右端搭接稀釋墊，在硝酸纖維素膜中部靠右的位置設置標記物墊，標記物墊上設置樣品墊、濾物墊，在硝酸纖維素膜上吸水墊與標記物墊之間設置檢測線和質控線，外殼上對應檢測線和質控線開設視窗孔，在視窗孔一側設有定量標識線，對應樣品墊開設加樣孔，對應稀釋墊開設清洗孔。本發明通過加樣孔加樣品，清洗孔加稀釋液的雙孔加樣、兩次定量控制樣本量的側流層析方法，不但提高被檢測物的靈敏性、精密性，而且還保留了快診檢測方法的快速和簡便特性。

技術領域

本發明涉及一種炭疽抗體雙孔快速檢測卡及檢測方法。

背景技術

炭疽(anthrax)是炭疽桿菌(Bacillus anthracis)引起的人畜共患的急性傳染病。炭疽主要為食草動物(牛、羊、馬等)的傳染病。人接觸患炭疽的動物后，可以受染而患病。炭疽桿菌是由皮膚侵入引起炭疽，使皮膚形成焦痂潰瘍與周圍膿腫和毒血癥，也可引起吸入性炭疽或胃腸炭疽，并發敗血癥。

我國歷年來炭疽發病數波動不大，在過去幾年中，貴州、新疆、甘肅、四川和廣西時有發病，這主要由于畜牧業的發展，群眾屠宰病畜造成土壤污染面積的增加引起的。

炭疽桿菌的外毒素由3個蛋白組成：保護性抗原(PA)，致死因子(LF)和水腫因子(EF)。PA結合于細胞表面受體，作為另兩因子的結合位點。二者一經結合，PA受體復合物就會促進LF和EF進入細胞內。在炭疽常發地區，為了防止炭疽的接觸感染，通常用采用接種炭疽桿菌減毒活疫苗。阻止牲畜發病而感染到人。當易感染動物有70％的有保護抗體時，就能對人產生有效的保護作用。

市場上使用檢測炭疽桿菌抗體酶標試劑盒，酶標試劑盒需要配備酶標儀、溫育反應條件、洗板機等設備，需在實驗室工作環境和專業技術人員操作，另外檢測樣本還需要復雜的前處理，如采集血液，分離血清等；而快速膠體金雖然檢測方便，不需專業技術人員，可用于現場，但其檢測的靈敏度低，且只能定性，檢測范圍又窄。因此，研制靈敏性高、快速、便捷、可在現場和野外進行精確檢測炭疽抗體的定量檢測技術顯得尤為重要。

發明內容

本發明的目的就是提供一種炭疽抗體雙孔快速檢測卡及檢測方法，能完全解決上述現有技術的不足之處。

本發明的目的通過下述技術方案來實現：

一種炭疽抗體雙孔快速檢測卡，包括安裝在外殼內的炭疽抗體檢測條。該炭疽抗體檢測條包括PVC底板、吸水墊、硝酸纖維素膜、標記物墊、樣品墊和稀釋墊，所述硝酸纖維素膜固定在PVC底板上，在硝酸纖維素膜左端搭接吸水墊，右端搭接稀釋墊，在硝酸纖維素膜中部靠右的位置設置標記物墊，標記物墊上設置樣品墊、濾物墊，在硝酸纖維素膜上吸水墊與標記物墊之間包被檢測線和質控線；

標記物墊上浸染標記鑭系熒光微球的炭疽桿菌保護性蛋白PA的重組抗原和標記鑭系熒光微球的雞IgY抗體；在檢測線上包被炭疽桿菌保護性蛋白PA的重組抗原，質控線上包被羊抗雞IgY抗體的IgG。

作為優選，所述外殼包括上蓋和下蓋，上蓋與下蓋扣合，在上蓋上對應檢測線和質控線開設視窗孔，對應樣品墊開設加樣孔，對應稀釋墊開設清洗孔。

作為優選，所述視窗孔一側設置有定量標識線(M)。

作為優選，所述定量標識線(M)為一根細實線。

作為優選，所述吸水墊與硝酸纖維素膜的搭接寬度為1-2mm，稀釋墊與硝酸纖維素膜的搭接寬度為1-2mm，標記物墊與稀釋墊之間有5-10mm的間距。