[發(fā)明專利]一種梓葉槭組織培養(yǎng)快速繁殖方法有效
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 202110105028.1 | 申請(qǐng)日： | 2021-01-26 |
| 公開(kāi)（公告）號(hào)： | CN112806264B | 公開(kāi)（公告）日： | 2023-03-31 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | 曾宋君;張雪蓮;李琳;吳坤林;房林 | 申請(qǐng)（專利權(quán)）人： | 中國(guó)科學(xué)院華南植物園 |
| 主分類號(hào)： | A01H4/00 | 分類號(hào)： | A01H4/00 |
| 代理公司： | 廣州科粵專利商標(biāo)代理有限公司 44001 | 代理人： | 胡素麗;劉明星 |
| 地址： | 510650 廣*** | 國(guó)省代碼： | 廣東;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 梓葉槭 組織培養(yǎng) 快速 繁殖 方法 | ||
本發(fā)明公開(kāi)了一種梓葉槭組織培養(yǎng)快速繁殖方法。本發(fā)明以梓葉槭的種子為外植體，通過(guò)外植體的消毒、不定芽誘導(dǎo)、不定芽增殖、生根培養(yǎng)和試管苗移栽等等階段，利用植物組織細(xì)胞的全能性和植物組織培養(yǎng)等生物技術(shù)進(jìn)行梓葉槭優(yōu)質(zhì)種苗的規(guī)模化生產(chǎn)，有利于梓葉槭的保護(hù)和可持續(xù)利用。本發(fā)明的方法操作程序和培養(yǎng)基獨(dú)特，消毒成功率高，并具有繁殖效率高、生長(zhǎng)速度快、種苗品質(zhì)好等特點(diǎn)，具有很好的市場(chǎng)前景。實(shí)施該發(fā)明只需有簡(jiǎn)單的植物組織培養(yǎng)設(shè)備即可進(jìn)行。
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于植物生物技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種梓葉槭組織培養(yǎng)快速繁殖方法。
背景技術(shù)：
梓葉槭(Acer catalpifolium Rehder)為槭樹科槭屬落葉喬木，為四川省特有種，屬于國(guó)家二級(jí)重點(diǎn)保護(hù)植物，2012年被列為國(guó)家極小種群野生植物。其分布區(qū)域狹窄，野外種群數(shù)量少，結(jié)實(shí)率低，同時(shí)，胚常發(fā)育不全，特別是由于低溫和果翅迫使種子休眠，而成熟后容易失水喪失發(fā)芽力，播種萌發(fā)率。
目前，國(guó)內(nèi)雖已有梓葉槭組織培養(yǎng)的專利報(bào)道，以帶芽莖段為外植體，污染率高。
發(fā)明內(nèi)容：
本發(fā)明的目的是克服現(xiàn)有技術(shù)中的不足，進(jìn)行梓葉槭種苗的規(guī)模化繁殖，提供一種梓葉槭組織培養(yǎng)快速繁殖方法。
本發(fā)明是通過(guò)以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的：
一種梓葉槭組織培養(yǎng)快速繁殖方法，包括以下步驟：
a.外植體的消毒方法：取梓葉槭(Acer catalpifolium Rehder)的種子，去除果翅后消毒處理，然后接種到種子萌發(fā)培養(yǎng)基中培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度24-28℃，光照度1500-2000lx，光照12-16小時(shí)/天；所述的種子萌發(fā)培養(yǎng)基每升含有：赤霉素GA3 0.5-1.5毫克、蔗糖15-25克、瓊脂適量(瓊脂6克)，其余為1/2MS培養(yǎng)基，pH 5.8-6.0；
b.不定芽誘導(dǎo)：以種子發(fā)芽后20-30天，苗高2-3厘米時(shí)，切取下胚軸接種到不定芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基中進(jìn)行不定芽的誘導(dǎo)，培養(yǎng)溫度24-28℃，光照度1500-2000lx，光照12-16小時(shí)/天，誘導(dǎo)出不定芽；所述的不定芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基每升含有：激動(dòng)素1-3毫克、椰子汁5-15毫升、蔗糖20-30克、瓊脂適量(瓊脂6克)，其余為改良的MS基本培養(yǎng)基，pH 5.8-6.0；
c.不定芽增殖：將誘導(dǎo)出的不定芽切割成單芽后繼代培養(yǎng)于不定芽增殖培養(yǎng)基進(jìn)行不定芽的增殖，培養(yǎng)溫度24-28℃，光照度1500-2000lx，光照12-16小時(shí)/天；所述的不定芽增殖培養(yǎng)基每升含有：激動(dòng)素0.1-0.3毫克、椰子汁5-15毫升、蔗糖20-30克、瓊脂適量(瓊脂6克)，其余為改良的MS基本培養(yǎng)基，pH 5.8-6.0；
d.生根培養(yǎng)：將3～4厘米高不定芽，切割成單芽后培養(yǎng)于生根培養(yǎng)基上進(jìn)行生根，培養(yǎng)溫度24-28℃，光照度1500-2000lx，光照12-16小時(shí)/天，得到試管苗；所述的生根培養(yǎng)基每升含有：吲哚乙酸0-0.1毫克、蔗糖10-20克、瓊脂適量(瓊脂6克)，其余為改良的MS基本培養(yǎng)基，pH 5.8-6.0；
e.試管苗移栽：在生根培養(yǎng)30-40天，試管苗長(zhǎng)至4-5厘米高時(shí)，在自然光照下煉苗5-7天，然后洗去根部培養(yǎng)基，栽入栽培基質(zhì)中培養(yǎng)，由此得到梓葉槭種苗；
所述的改良的MS基本培養(yǎng)基是將MS基本培養(yǎng)基中的硝酸鉀替換為硫酸鉀，硫酸鉀含量為800毫克/升，其余成份不變。
所述的消毒處理具體為：先在體積分?jǐn)?shù)75％酒精中浸泡10-30秒，用1.0％有效氯的次氯酸溶液浸泡3-5分鐘，無(wú)菌水沖洗4-5次后，再用質(zhì)量分?jǐn)?shù)0.1％升汞溶液消毒5-8分鐘，無(wú)菌水沖洗4-5次。
所述的栽培基質(zhì)包括泥炭土和珍珠巖，所述的泥炭土和珍珠巖的體積比為(2-4):1。
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