[發明專利]一種梓葉槭組織培養快速繁殖方法

有效

• 申請號: 202110105028.1
• 申請日: 2021-01-26
• 公開（公告）號: CN112806264B
• 公開（公告）日: 2023-03-31
• 發明（設計）人: 曾宋君;張雪蓮;李琳;吳坤林;房林
• 申請（專利權）人: 中國科學院華南植物園
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 廣州科粵專利商標代理有限公司 44001
• 代理人: 胡素麗;劉明星

本發明公開了一種梓葉槭組織培養快速繁殖方法。本發明以梓葉槭的種子為外植體，通過外植體的消毒、不定芽誘導、不定芽增殖、生根培養和試管苗移栽等等階段，利用植物組織細胞的全能性和植物組織培養等生物技術進行梓葉槭優質種苗的規模化生產，有利于梓葉槭的保護和可持續利用。本發明的方法操作程序和培養基獨特，消毒成功率高，并具有繁殖效率高、生長速度快、種苗品質好等特點，具有很好的市場前景。實施該發明只需有簡單的植物組織培養設備即可進行。

技術領域：

本發明屬于植物生物技術領域，具體涉及一種梓葉槭組織培養快速繁殖方法。

背景技術：

梓葉槭(Acer catalpifolium Rehder)為槭樹科槭屬落葉喬木，為四川省特有種，屬于國家二級重點保護植物，2012年被列為國家極小種群野生植物。其分布區域狹窄，野外種群數量少，結實率低，同時，胚常發育不全，特別是由于低溫和果翅迫使種子休眠，而成熟后容易失水喪失發芽力，播種萌發率。

目前，國內雖已有梓葉槭組織培養的專利報道，以帶芽莖段為外植體，污染率高。

發明內容：

本發明的目的是克服現有技術中的不足，進行梓葉槭種苗的規模化繁殖，提供一種梓葉槭組織培養快速繁殖方法。

本發明是通過以下技術方案實現的：

一種梓葉槭組織培養快速繁殖方法，包括以下步驟：

a.外植體的消毒方法：取梓葉槭(Acer catalpifolium Rehder)的種子，去除果翅后消毒處理，然后接種到種子萌發培養基中培養，培養溫度24-28℃，光照度1500-2000lx，光照12-16小時/天；所述的種子萌發培養基每升含有：赤霉素GA₃ 0.5-1.5毫克、蔗糖15-25克、瓊脂適量(瓊脂6克)，其余為1/2MS培養基，pH 5.8-6.0；

b.不定芽誘導：以種子發芽后20-30天，苗高2-3厘米時，切取下胚軸接種到不定芽誘導培養基中進行不定芽的誘導，培養溫度24-28℃，光照度1500-2000lx，光照12-16小時/天，誘導出不定芽；所述的不定芽誘導培養基每升含有：激動素1-3毫克、椰子汁5-15毫升、蔗糖20-30克、瓊脂適量(瓊脂6克)，其余為改良的MS基本培養基，pH 5.8-6.0；

c.不定芽增殖：將誘導出的不定芽切割成單芽后繼代培養于不定芽增殖培養基進行不定芽的增殖，培養溫度24-28℃，光照度1500-2000lx，光照12-16小時/天；所述的不定芽增殖培養基每升含有：激動素0.1-0.3毫克、椰子汁5-15毫升、蔗糖20-30克、瓊脂適量(瓊脂6克)，其余為改良的MS基本培養基，pH 5.8-6.0；

d.生根培養：將3～4厘米高不定芽，切割成單芽后培養于生根培養基上進行生根，培養溫度24-28℃，光照度1500-2000lx，光照12-16小時/天，得到試管苗；所述的生根培養基每升含有：吲哚乙酸0-0.1毫克、蔗糖10-20克、瓊脂適量(瓊脂6克)，其余為改良的MS基本培養基，pH 5.8-6.0；

e.試管苗移栽：在生根培養30-40天，試管苗長至4-5厘米高時，在自然光照下煉苗5-7天，然后洗去根部培養基，栽入栽培基質中培養，由此得到梓葉槭種苗；

所述的改良的MS基本培養基是將MS基本培養基中的硝酸鉀替換為硫酸鉀，硫酸鉀含量為800毫克/升，其余成份不變。

所述的消毒處理具體為：先在體積分數75％酒精中浸泡10-30秒，用1.0％有效氯的次氯酸溶液浸泡3-5分鐘，無菌水沖洗4-5次后，再用質量分數0.1％升汞溶液消毒5-8分鐘，無菌水沖洗4-5次。

所述的栽培基質包括泥炭土和珍珠巖，所述的泥炭土和珍珠巖的體積比為(2-4):1。