[發明專利]與雞開產日齡和產蛋量相關的HSD3B1基因SNP分子標記及應用

在審

• 申請號: 202110103460.7
• 申請日: 2021-01-26
• 公開（公告）號: CN112899372A
• 公開（公告）日: 2021-06-04
• 發明（設計）人: 馬騰壑;李夢霄;王紅娜;劉小輝;劉超;王斌;石玉祥
• 申請（專利權）人: 河北工程大學
• 主分類號: C12Q1/6888
• 分類號: C12Q1/6888;C12N15/11
• 代理公司: 蘇州言思嘉信專利代理事務所(普通合伙) 32385
• 代理人: 劉巍

1.與雞開產日齡和產蛋量性狀相關的SNP分子標記，其特征在于，所述SNP分子標記來自HSD3B1基因，核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，在SEQ ID NO.1所示序列自第5’端第94位堿基C突變成了T。

2.根據權利要求1所述的與雞開產日齡和產蛋量性狀相關的SNP分子標記，其特征在于，HSD3B1基因第274位堿基為C的個體表現開產早。

3.如權利要求1或2所述的雞開產日齡和產蛋量性狀相關的SNP分子標記在雞遺傳育種中的應用。

4.根據權利要求3所述的應用，其特征在于，應用于高產蛋雞品種的選育和/或早開產日齡蛋雞的選育。

5.一種檢測與雞開產日齡和產蛋量性狀相關的SNP分子標記的PCR引物，其特征在于，采用標記引物P-HSD3B1，包括：

P-HSD3B1F：5'GCCCAAGGTGTCAATGAT 3'；

P-HSD3B1R：5'AAGACCCTCTGTGCCATT 3'。

6.如權利要求5所述引物在輔助選育高產蛋雞品種的選育和/或早開產日齡蛋雞品種中的應用。

7.一種檢測與雞開產日齡和產蛋量性狀相關的SNP分子標記的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒中包含權利要求5所述的引物。

8.如權利要求7所述試劑盒在輔助選育高產蛋雞品種的選育和/或早開產日齡蛋雞品種中的應用。

9.一種與雞開產日齡相關的SNP分子標記方法，其特征在于：

(1)基因組DNA提取：翅靜脈采血，提取基因組DNA，-20℃保存；

(2)引物設計：采用標記引物P-HSD3B1，包括：

P-HSD3B1F：5'GCCCAAGGTGTCAATGAT 3'；

P-HSD3B1R：5'AAGACCCTCTGTGCCATT 3'；

(3)PCR擴增：

PCR反應體系：50-100ng/μL基因組DNA模板0.5μL，2×Taq Master Mix 10μL、10μM P-HSD3B1F和10μM P-HSD3B1R引物各0.5μL，ddH₂O 8.5μL；

PCR擴增程序：94℃預變性2min；94℃變性30sec，63℃退火30sec，72℃延伸30sec，進行29個循環；循環結束72℃孵育7min；

(4)電泳檢測：將擴增產物用凝膠電泳檢測，得到樣本對應的基因型，在HSD3B1基因第274位堿基檢測到1個突變位點，堿基為C的個體與雞的開產日齡性狀相關。

10.利用權利要求1或2所述SNP分子標記輔助進行早開產日齡蛋雞品種選育的方法，其特征在于，包括以下步驟：在雞群體中，選擇基因型CC純合基因型公雞和CC的純合基因型母雞相互交配，得到的后代母雞的開產日齡顯著早于其他基因型，所述的CC純合基因型為在SEQ ID NO.1所示序列自第5’端第94位堿基是C，或者HSD3B1基因第274位點Exon3堿基為C。