[發(fā)明專利]用于生產(chǎn)烏司奴單抗的生物類似藥的細胞株及生產(chǎn)方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202110099804.1
• 申請日: 2021-01-25
• 公開（公告）號: CN112852743B
• 公開（公告）日: 2021-11-02
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 徐正學(xué);李濤;陳寅;黃文俊;王軼;喬懷耀;房敏;吳亦亮;張夢丹
• 申請（專利權(quán)）人: 江蘇荃信生物醫(yī)藥有限公司
• 主分類號: C12N5/10
• 分類號: C12N5/10;C12N15/85;C07K16/24
• 代理公司: 北京唐頌永信知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11755
• 代理人: 劉偉

本發(fā)明公開了用于生產(chǎn)烏司奴單抗的生物類似藥的細胞株及生產(chǎn)方法。具體公開了一種中國倉鼠卵巢細胞S細胞株，其保藏于中國典型培養(yǎng)物保藏中心，保藏號為CCTCC NO：C2020232。該細胞株表達抗人IL?12、人IL?23共有的p40亞基的全人源單克隆抗體。所述抗人IL?12、人IL?23共有的p40亞基的全人源單克隆抗體是烏司奴單抗(Ustekinumab)的生物類似藥，其不僅在臨床前研究中展現(xiàn)了與烏司奴單抗的高度一致性，而且在臨床研究中通過了藥代動力學(xué)生物等效性和安全性相似性評價，成為目前為止國內(nèi)首個進入臨床試驗、唯一一個完成了I期臨床實驗的烏司奴單抗生物類似藥，也是國際上新藥申報進展最快的烏司奴單抗生物類似藥之一。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及抗體藥物領(lǐng)域。具體地，本發(fā)明涉及一種可用于生產(chǎn)烏司奴單抗(Ustekinumab，商品名為)的生物類似藥的中國倉鼠卵巢細胞 S(CHO-S)細胞株及利用該CHO-S細胞株生產(chǎn)烏司奴單抗的生物類似藥的方法。

背景技術(shù)

烏司奴單抗(Ustekinumab，商品名為)由強生公司開發(fā)，為靶向人IL-12、IL-23共有的p40亞基的全人源單克隆抗體。IL-12和IL-23是活化的抗原呈遞細胞表達的異源二聚體細胞因子，IL-12能激活NK細胞從而促進CD4⁺T細胞分化成為輔助T細胞1(Th1)，IL-23能激活輔助T細胞 17(Th17)途徑。IL-12和IL-23的調(diào)節(jié)異常與免疫相關(guān)疾病密切相關(guān)。烏司奴單抗通過阻斷IL-12和IL-23共有的p40亞基與靶細胞表面的IL-12Rβ1受體蛋白的結(jié)合，抑制IL-12和IL-23介導(dǎo)的信號傳導(dǎo)和細胞因子級聯(lián)反應(yīng)，從而在銀屑病、炎癥性腸炎等自身免疫性疾病患者體內(nèi)發(fā)揮療效。于 2008年在加拿大上市，其后分別在歐洲、美國、日本等地上市，已批準的臨床適應(yīng)癥包括銀屑病、銀屑病關(guān)節(jié)炎、克羅恩病、潰瘍性結(jié)腸炎等。

強生公司生產(chǎn)的烏司奴單抗采用SP2/0細胞作為宿主細胞進行表達，該 SP2/0細胞表達的抗體具有較高比例的唾液酸修飾，作為藥物進入人體后有一定的免疫原性風(fēng)險。理論上更換宿主細胞表達烏司奴單抗，可能降低其免疫原性風(fēng)險。但一般而言，不同種類的宿主細胞表達的同一單克隆抗體，即使氨基酸序列相同，也可能由于糖基化方式不同等原因而存在結(jié)構(gòu)差別，容易造成理化性質(zhì)、生物活性、體內(nèi)代謝行為等方面的差異，導(dǎo)致生物類似藥與原研藥相似度低，無法通過相似性評價。這是生物類似藥研發(fā)中的一大難點，也是雖然烏司奴單抗的專利保護即將到期，但關(guān)于其生物類似藥卻訊息寥寥的一個重要原因。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于提供一種可用于生產(chǎn)關(guān)鍵理化參數(shù)、生物學(xué)功能等方面與烏司奴單抗高度相似的生物類似藥的細胞株，以及生產(chǎn)烏司奴單抗的生物類似藥的方法。

具體來說，本發(fā)明包括：

1.一種中國倉鼠卵巢細胞S(CHO-S)細胞株，其保藏于中國典型培養(yǎng)物保藏中心(CCTCC)，保藏號為CCTCC NO：C2020232；其表達抗人IL-12、人IL-23共有的p40亞基的全人源單克隆抗體，所述全人源單克隆抗體的重鏈氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示，所述全人源單克隆抗體的輕鏈氨基酸序列如SEQ ID NO：3所示；其包含表達所述抗人IL-12、人IL-23共有的 p40亞基的全人源單克隆抗體的表達質(zhì)粒，所述表達質(zhì)粒包含如SEQ ID NO： 2所示的編碼所述全人源單克隆抗體的重鏈氨基酸序列的核苷酸序列，以及如SEQ ID NO：4所示的編碼所述全人源單克隆抗體的輕鏈氨基酸序列的核苷酸序列。

2.根據(jù)項1所述的CHO-S細胞株，其表達的所述抗人IL-12、人IL-23 共有的p40亞基的全人源單克隆抗體基本不含唾液酸化組分。

3.根據(jù)項1所述的CHO-S細胞株，其表達的所述抗人IL-12、人IL-23 共有的p40亞基的全人源單克隆抗體是烏司奴單抗(Ustekinumab)的生物類似藥。