[發明專利]一種豬尿基質中扼合態和游離態共存的萊克多巴胺標準物質及其制備方法與應用

有效

• 申請號: 202110099431.8
• 申請日: 2021-01-25
• 公開（公告）號: CN112903875B
• 公開（公告）日: 2023-02-17
• 發明（設計）人: 單吉浩;李建勛;馬康;薛曉鋒;邢富國;隋福順;盧培培;趙玉樂;徐迪
• 申請（專利權）人: 中國農業科學院農產品加工研究所
• 主分類號: G01N30/06
• 分類號: G01N30/06;G01N30/02;G01N30/72
• 代理公司: 北京路浩知識產權代理有限公司 11002
• 代理人: 陳征

本發明公開了一種豬尿基質中扼合態和游離態共存的萊克多巴胺標準物質及其制備方法與應用。飼喂動物萊克多巴胺獲得豬尿原料，定值后獲得豬尿凍干粉中含游離態和扼合態共存的萊克多巴胺標準物質；加水復溶還原成液體，經混合生物酶酶解法前處理，液相色譜?串聯質譜/同位素內標法聯合定值，確定該基體標準物質中萊克多巴胺含量。本發明所提供方法制備的標準物質，能真實反映了經動物體內代謝后豬尿中萊克多巴胺標準物質呈扼合態和游離態共存的狀況，在現場快速檢測中比臨時添加配制的標準品定值更準確，均勻性和穩定性良好，可廣泛應用于動物尿液中萊克多巴胺殘留檢測、快速篩查產品的質量驗證、儀器檢測方法評價、實驗室內部質量控制等領域。

技術領域

本發明涉及獸藥殘留檢測標準品制備技術領域，具體涉及一種經動物代謝后豬尿凍干粉中扼合態和游離態共存的萊克多巴胺標準物質及其制備方法。

背景技術

萊克多巴胺是β₂-受體激動劑類中的一種，也是被俗稱“瘦肉精”一類物質中較早出現、最具典型的代表之一的有毒有害化合物，其特點為成本低、起效快，曾多次被曝光在動物養殖中違法違禁使用，給人體健康和公共衛生安全帶來嚴重風險。萊克多巴胺一直被列入動物食品重點監測參數，目前針對于豬肉、豬肝等可食性動物組織及豬尿中萊克多巴胺殘留測定方法較多，儀器方法通常用液相色譜-串聯質譜(LC-MS/MS)法，快速篩查方法一般用酶聯免疫(ELISA)法和膠體金試紙條法。

但是由于對豬肉、豬肝等進入市場后的產品進行監測，存在著較強的滯后性，不僅難以及時追溯和追回，也難以對有問題的產品進行處理銷毀，同時造成極大的浪費。因此，針對動物產品質量安全的監控，動物尿液是一種具有方便、快捷、直接、低成本、可預警等突出優點的監測靶物質，可以在不必屠宰動物的前提下及時有效監測動物是否使用違禁物質，從而更有效的提升食品安全的監管能力，避免問題產品流入市場，還可以通過動物代謝等方法消除殘留物，減少不必要的損失，具有極強的經濟效益。

截止目前，無論是在養殖場、屠宰場普遍使用的ELISA法和試紙條法等快速篩查檢測，還是在實驗室使用LC-MS/MS等儀器法確證檢測豬尿中萊克多巴胺的工作，都是通過臨時添加萊克多巴胺標準溶液到保存時間很久的所謂“空白”豬尿中，模擬配制含有萊克多巴胺的豬尿陽性樣品，作為質控樣品或基質標準樣品。但是國內外有大量實驗和文獻可以證明，通過人工外源添加“臨時配制”得到的樣品，與經過動物體內代謝得到的樣品，無論從樣品的真實性、代表性，還是從樣品基質本身對目標物的存在狀態的影響性上，都有很大的區別。用人工外源添加“臨時配制”得到的豬尿中萊克多巴胺，由于沒有經過動物體內循環代謝過程，因此全部處于游離態；而前期國內外有大量試驗和文獻表明，經過動物代謝后的豬尿中的萊克多巴胺，有一定的比例(約5％-15％)處于扼合物狀態。因此通過“臨時配制”得到的模擬含有萊克多巴胺的所謂豬尿陽性樣品，在食品安全監測工作中會嚴重影響到檢測結果的準確性、可靠性和可比性。鑒于此，為了進一步加強食品安全監測工作中對萊克多巴胺的準確、有效監控，規范快速篩查檢測方法中市場產品的驗證，科學評判確證檢測中的儀器方法評價，提高實驗室內部質量控制和外部能力比對水平，迫切需要一種均勻性和穩定性良好的、經動物代謝后豬尿中呈扼合態和游離態共存的萊克多巴胺標準物質，這將會起著不可或缺的作用。

發明內容

本發明的目的是提供一種真實反映經動物代謝后豬尿基質的、均勻性和穩定性良好的、豬尿凍干粉中扼合態和游離態共存的萊克多巴胺標準物質。