[發明專利]一種利用組織培養技術繁育天麻的方法

有效

• 申請號: 202110098745.6
• 申請日: 2021-01-25
• 公開（公告）號: CN112741002B
• 公開（公告）日: 2023-09-01
• 發明（設計）人: 王彩云;侯俊;王永;柳敏;徐慶祝;成忠均;周茂嫦;李恒謙;張翔宇;阮培均;鄒濤;黃曉旭;查欽;陳杰
• 申請（專利權）人: 畢節市中藥研究所
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 北京鑫瑞森知識產權代理有限公司 11961
• 代理人: 劉晶

1.一種利用組織培養技術繁育天麻的方法，包括以下步驟：菌種培養、碩果培育、消毒、接種；其特征在于，

所述的菌種培養，包括蜜環菌擴大培養和萌發菌擴大培養；在接種過程中是先接種萌發菌再接種蜜環菌；接種完成待天麻長出米麻后進行促生長處理；所述的蜜環菌擴大培養，所用的蜜環菌培養基其原料組成按質量分數比計為：米糠45～55％、玉米面15～25％、鋸木面15～25％、白糖1～2％、石膏1～2％、硫酸鎂0.05～0.15％、磷酸二氫鉀0.1～0.25％，剩余為溶劑；其中，溶劑為土豆煮水后的濾液；所述的萌發菌擴大培養，所用的萌發菌培養基其原料組成按質量分數比計為：米糠60～75％、玉米面10～20％、鋸木面5～15％、白糖1～2％、石膏1～2％、硫酸鎂0.05～0.15％、磷酸二氫鉀0.1～0.2％，剩余為水；

所述的接種，具體包括以下步驟：

a.碩果接種：將新鮮碩果消毒后，在超凈工作臺中，用無菌吸水紙吸干天麻碩果表面的水分，剝開果莢，將種子接種到萌發菌擴大培養基中；

b.接種蜜環菌：待萌發菌培養基中長滿菌絲潔白的萌發菌時，將蜜環菌擴大培養菌種切成1.5～2.0cm×1.5～2.0cm大小，接種到萌發菌與天麻種子的共培養瓶中；

c.接種鋸木段：將新鮮鋸木段接種于蜜環菌、萌發菌、種子的共培養瓶中；接種時間為蜜環菌接種后15～30天，所接種的鋸木段為2～3根長度為3cm、直徑1.5～2cm的新鮮鋸木段，并在接種前將新鮮鋸木段在125℃、101KPa下滅菌45～60分鐘；

所述的促生長處理，是在米麻長出后采用藍紫光進行補充光照，同時輔以超聲波輻射處理，溫度保持在12～16℃，濕度為75～85％。

2.如權利要求1所述的一種利用組織培養技術繁育天麻的方法，其特征在于，所述的蜜環菌培養基是將原料混合后于121℃、101KPa下滅菌30分鐘制得，培養基含水量為75～90％；蜜環菌的接種量為1cm×1cm的蜜環菌母種塊1～2塊。

3.如權利要求2所述的一種利用組織培養技術繁育天麻的方法，其特征在于，所述的萌發菌培養基是將原料混合后于121℃、101KPa下滅菌30分鐘制得，培養基含水量為85～100％；萌發菌的接種量為1.5cm×1.5cm的萌發菌母種塊1～2塊。

4.如權利要求3所述的一種利用組織培養技術繁育天麻的方法，其特征在于，所述的消毒，具體是以75％的酒精將碩果沖洗消毒45～90s，用無菌水清洗3次后，用0.1％的升汞浸泡消毒8～15min，再用無菌水清洗5次。