[發明專利]通過單個氧化還原分子的雙峰信號實現E-AB傳感器免校準的檢測方法

在審

• 申請號: 202110098269.8
• 申請日: 2021-01-25
• 公開（公告）號: CN112858444A
• 公開（公告）日: 2021-05-28
• 發明（設計）人: 李少光;徐帆;李輝;朱滿;夏帆
• 申請（專利權）人: 中國地質大學（武漢）
• 主分類號: G01N27/48
• 分類號: G01N27/48
• 代理公司: 武漢知產時代知識產權代理有限公司 42238
• 代理人: 王佩

本發明公開了通過單個氧化還原分子的雙峰信號實現E?AB傳感器免校準的電化學檢測方法。本方法將單個氧化還原分子修飾的適配體組裝到電位儀的工作電極表面，將工作電極放入含有已知濃度靶標的待檢測樣品中對其用方波伏安法掃描，改變靶標濃度，收集出現的兩個峰值信號的峰值電流，并將其進行差值或比率處理，繪制得到峰值電流比率信號或峰值電流差值信號與靶標濃度關系的標準曲線圖；將工作電極放入含有未知濃度靶標的待檢測樣品，收集出現的兩個峰值信號的峰值電流，并進行數據處理，并在標準曲線圖上找到對應的靶標濃度。本方法利用單個氧化還原分子的產生雙峰現象，根據雙峰信號對靶標濃度響應的差異性從而實現免校準的檢測方法。

技術領域

本發明涉及生物檢測技術領域，尤其涉及一種通過單個氧化還原分子的雙峰信號實現E-AB傳感器免校準的檢測方法。

背景技術

生物分子識別具有通用性，特異性和高親和力，這些特性激發了數十年來旨在將生物分子改編為分子傳感通用平臺的研究。基于電化學適配體(electrochemicalaptamer-based，E-AB)的傳感器，是可用于小分子、蛋白質和金屬離子的檢測平臺。E-AB傳感器是利用修飾有氧化還原信號分子的配體作為識別元件。當靶分子與適配體結合時會導致其構象變化，從而改變了氧化還原信號分子與電極表面的電子傳遞效率，利用方波伏安法等電化學方法可檢測這種信號變化，最終達到檢測靶分子的目的。這一機制也使得E-AB傳感器具有足夠的靈敏度和選擇性，他們在復雜的介質中，如全血，甚至在活體動物中都有良好的表現。

基于電化學適配體(E-AB)的生物傳感器由于固定在電極表面上的探針總數和電極間的異質性使得傳感器間信號差異很大，因此，這種類型的傳感器常常需要校準過程，這在諸如血液樣本或體內測試環境中造成不便甚至難以實現，從而極大地限制了生物傳感器的廣泛臨床應用。因此，針對這一難題，如何開發出一種測試過程中無需頻繁校準的傳感器件，已成為如今的迫切需求。

發明內容

本發明的目的在于，針對現有技術的上述不足，提出一種通過單個氧化還原分子的雙峰信號實現E-AB傳感器免校準的電化學檢測方法。

本發明的一種通過單個氧化還原分子的雙峰信號實現E-AB傳感器免校準的電化學檢測方法，包括如下具體步驟：S1：繪制標準曲線圖,將單個氧化還原分子修飾的適配體組裝到電位儀的工作電極表面，并將工作電極與電位儀相連，將工作電極放入含有已知濃度靶標的待檢測樣品中對其用方波伏安法掃描，不斷改變待檢測樣品中的靶標濃度，收集出現的兩個峰值信號的峰值電流，并將其進行差值或比率處理，繪制得到峰值電流比率信號或峰值電流差值信號與靶標濃度關系的標準曲線圖；S2：將所述工作電極放入含有未知濃度靶標的待檢測樣品，打開電位儀，收集出現的兩個峰值信號的峰值電流，并將其進行差值或比率處理，并根據得到的差值或比率在標準曲線圖上找到對應的靶標濃度。

進一步的，所述單個氧化還原分子包括亞甲基藍或DOX。

進一步的，所述待檢測樣品包括全血。