[發明專利]一種黑曲霉、胞外分泌產物及應用

在審

• 申請號: 202110095046.6
• 申請日: 2021-01-25
• 公開（公告）號: CN113416648A
• 公開（公告）日: 2021-09-21
• 發明（設計）人: 劉雪;馬晟;徐其靜;羅增明;李林;方迪
• 申請（專利權）人: 西南林業大學
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;C12P1/02;C02F3/34;C12R1/685;C02F101/20
• 代理公司: 重慶市信立達專利代理事務所(普通合伙) 50230
• 代理人: 陳炳萍

1.如權利要求3所述黑曲霉胞外分泌產物制備方法，其特征在于，所述平板培養基包括：按照200g/L的比例稱取馬鈴薯200g，將稱取的馬鈴薯去皮洗凈，切成小塊，加水煮至馬鈴薯變軟，用八層紗布過濾，濾液加入15～20g/L的瓊脂和20g/L葡萄糖，混勻后用蒸餾水補充至1000mL，121℃滅菌20min，即可得平板培養基。

2.如權利要求3所述黑曲霉分泌產物制備方法，其特征在于，步驟二中，所述發酵培養基包括：將1.5g/L NaNO₃、0.5g/L KH₂PO₄、0.025g/L KCl、0.025g/L MgSO₄·7H₂O、120g/L乳糖以及2.6g/L酵母膏混合，調節pH為6.5，121℃高壓滅菌20min即可得所述發酵培養基。

3.如權利要求3所述黑曲霉胞外分泌產物制備方法，其特征在于，步驟二中，所述培養至預定時間包括：培養預定時間為116h。

4.如權利要求3所述黑曲霉胞外分泌產物制備方法，其特征在于，步驟四中，所述氯仿:正丁醇＝5:1(V/V)；

步驟四中，所述離心包括：離心速度為8000rpm，離心時間為10min，離心溫度為4℃；

步驟五中，所述將脫蛋白處理后的ECP溶液采用乙醇分級沉淀冷凍離心包括：將脫蛋白處理后的ECP溶液用25％冰乙醇于4℃下沉淀24h，去除核酸；離心收集上清液；再用75％冰乙醇于4℃下沉淀24h。

5.一種重金屬廢水污染治理與修復方法，其特征在于，所述如權利要求2所述的黑曲霉胞外分泌產物。