[發明專利]粒細胞分離液制備方法在審
| 申請號： | 202110092567.6 | 申請日： | 2021-01-24 |
| 公開（公告）號： | CN112481210A | 公開（公告）日： | 2021-03-12 |
| 發明（設計）人： | 張瑩華;趙麗 | 申請（專利權）人： | 杏和（北京）醫療科技有限公司 |
| 主分類號： | C12N5/0787 | 分類號： | C12N5/0787 |
| 代理公司： | 暫無信息 | 代理人： | 暫無信息 |
| 地址： | 101300 北京市順義*** | 國省代碼： | 北京;11 |
| 權利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 粒細胞 分離 制備 方法 | ||
本發明公開了粒細胞分離液制備方法，包括兩種分離液，且兩種分離液分別為A液和B液；A液的制備方法如下：準備一支干凈的離心管，做好標記：A液；在離心管中加入12.615mL純水；再加入5mL1.5M的NaCl溶液；將離心管以及內部溶液放入無菌恒溫箱中加熱到70攝氏度，保存1小時；取出離心管迅速加入加入32.385mLporcell原液；把離心管放入攪拌機內充分攪拌5分鐘，A液制備完成。B液的制備方法與A液的制備方法一致。本發明以所配制出來的兩種密度的分離液結合使用，對粒細胞進行分離，其效果相比于市面上所售的粒細胞分離試劑盒的效果要好，所分離出來的粒細胞在細胞數量、細胞活性、細胞純度方面都是較優的，其次利用該分離液進行粒細胞分離操作簡單，用時較短。
技術領域
本發明涉及生物醫學技術領域，尤其涉及粒細胞分離液制備方法。
背景技術
粒細胞是機體固有免疫系統的重要組成部分，在調節機體免疫應答過程中發揮重要作用。近年來研究表明：粒細胞不僅具有抗菌作用，而且具有顯著的抗腫瘤作用。對于粒細胞，作為生物制劑，同一來源的粒細胞對不同腫瘤的殺傷活性不同；同一腫瘤，不同的粒細胞對其的殺傷活性也不同。因此需要切實可行的技術方法篩選出抗癌活性高的粒細胞，為臨床提供治療方案依據，現有技術如紅細胞裂解法以及紅細胞沉降法無法高效的分離出高純度、高活性的粒細胞，也就沒辦法進一步的篩選出抗癌活性高的粒細胞。
發明內容
基于背景技術存在的技術問題，本發明提出了粒細胞分離液制備方法。
本發明提出的粒細胞分離液制備方法，包括兩種分離液，且兩種分離液分別為A液和B液；
A液的制備方法如下：
S1準備一支干凈的離心管，做好標記：A液；
S2在離心管中加入12.615mL純水；
S3再加入5mL1.5M的NaCl溶液；
S4將離心管以及內部溶液放入無菌恒溫箱中加熱到70攝氏度，保存1小時；
S5取出離心管迅速加入加入32.385mLporcell原液；
S6把離心管放入攪拌機內充分攪拌5分鐘，A液制備完成；
S7將制備完成的溶液放入無菌試劑瓶中，密封保存，保存環境為0度——6度，制備成密度為1.090g/mL的A液；
B液的制備方法如下：
S1準備一支干凈的離心管，做好標記：B液；
S2在離心管中加入17.615mL純水；
S3再加入5mL1.5M的NaCl溶液；
S4將離心管以及內部溶液放入無菌恒溫箱中加熱到70攝氏度，保存1小時；
S5取出離心管迅速加入加入27.385mLporcell原液；
S6把離心管放入攪拌機內充分攪拌5分鐘，B液制備完成；
S7將制備完成的溶液放入無菌試劑瓶中，密封保存，保存環境為0度——6度，制備成密度為1.077g/mL的B液。
優選的，所述A液和B液的制備均位于無菌、無塵車間內。
優選的，所述A液的制備方法中通過移液槍將制備完成的溶液放入無菌試劑瓶中。
優選的，所述B液的制備方法中通過移液槍將制備完成的溶液放入無菌試劑瓶中。
優選的，所述A液和B液均放置在低溫冰箱中保存。
本發明中，所述粒細胞分離液制備方法，以所配制出來的兩種密度的分離液結合使用，對粒細胞進行分離，其效果相比于市面上所售的粒細胞分離試劑盒的效果要好，所分離分出來的粒細胞在細胞數量、細胞活性、細胞純度方面都是較優的，其次利用該分離液進行粒細胞分離操作簡單，用時較短。
具體實施方式
該專利技術資料僅供研究查看技術是否侵權等信息，商用須獲得專利權人授權。該專利全部權利屬于杏和（北京）醫療科技有限公司，未經杏和（北京）醫療科技有限公司許可，擅自商用是侵權行為。如果您想購買此專利、獲得商業授權和技術合作，請聯系【客服】
本文鏈接：http://www.szxzyx.cn/pat/books/202110092567.6/2.html，轉載請聲明來源鉆瓜專利網。
