[發明專利]一種抑制枇杷成花的方法

在審

• 申請號: 202110090947.6
• 申請日: 2021-01-22
• 公開（公告）號: CN113039955A
• 公開（公告）日: 2021-06-29
• 發明（設計）人: 蔣園園;林順權;彭江容;蘇文炳;王曼;馬崇堅;原遠
• 申請（專利權）人: 韶關學院
• 主分類號: A01G7/06
• 分類號: A01G7/06;A01G17/00
• 代理公司: 深圳得本知識產權代理事務所(普通合伙) 44762
• 代理人: 袁江龍

1.一種抑制枇杷成花的方法，其特征在于：包括以下步驟：

步驟一：選擇需要枇杷植株；

步驟二：確認枇杷植株的花芽分化時間；

步驟三：在枇杷成花的前一個半月用相當濃度的處理劑處理植株；

步驟四：觀察枇杷植株的生長狀況和花芽分化情況，并監測枇杷頂芽成花特異基因的表達情況。

2.根據權利要求1所述的一種抑制枇杷成花的方法，其特征在于：所述步驟一選取的植株為自然條件下生長的已開花結果至少一年的枇杷植株。

3.根據權利要求1所述的一種抑制枇杷成花的方法，其特征在于：所述步驟二確認枇杷植株花芽分化時間采用的是通過對枇杷頂芽石蠟切片和頂芽中成花特異基因EjAP1-1、EjAP1-2、EjLFY-1和EjLFY-2的表達情況分析，確認了枇杷開花的準確時間。

4.根據權利要求3所述的一種抑制枇杷成花的方法，其特征在于：所述枇杷頂芽切片方法為在前一年對植株的頂芽全年連續跟蹤拍攝記錄表型(14天一次，花芽分化時期一周一次)，每次觀測的同時，取成熟度相一致的頂芽固化-軟化-沖洗-梯度脫水-染色-透明-浸蠟-包埋-切片和展片-看片-烤片-脫蠟-封片，最后看片并拍照。

5.根據權利要求4所述的一種抑制枇杷成花的方法，其特征在于：所述固化為剝離包被的芽鱗片，置于FAA溶液(70％乙醇：37％甲醛：冰醋酸＝9:1:1)中固定24-48h，所述軟化為4％乙二胺5-10d，所述梯度脫水為15％乙醇-30％乙醇-50％乙醇-70％乙醇-80％乙醇-95％乙醇-無水乙醇-無水乙醇，逐級脫水1h，所述染色為番紅飽和溶液(溶劑為1/2無水酒精+1/2二甲苯)染色2-3h，所述透明為1/2無水酒精+1/2二甲苯中透明0.5h，100％二甲苯中透明0.5h，100％二甲苯中透明0.5h，100％二甲苯至小瓶2.5格處透明0.5h。

6.根據權利要求4所述的一種抑制枇杷成花的方法，其特征在于：所述浸蠟為加蠟至3.5ml處40℃恒溫水浴0.5h，加蠟至4.5ml處40℃恒溫水浴0.5h，加蠟至5ml處40℃恒溫水浴≥1d，50％蠟(二甲苯)0.5h，75％蠟(二甲苯)0.5h，純蠟A鍋0.5-1h，純蠟B鍋0.5-1h，純蠟C鍋0.5-1h，所述包埋為純石蠟，在恒溫水浴鍋上保溫(65-70℃)，在包埋機上擺放好芽，滴入適量石蠟沒過芽約0.5cm，所述切片和展片為取石蠟包埋好的芽，置于方形木塊。確保芽縱切面平行擺放與木塊上，利用酒精燈燒制部分石蠟液，然后將切好的帶芽蠟塊固定于方形木塊上，然后固定于切片機。手動切約8μm左右厚度切片。切片切好后置于40℃恒溫水浴展片，可適當連續切幾個一起展片，所述看片為展片后利用鑷子小心將切片轉移至載玻片上(此過程在40℃恒溫水浴中進行)，擦拭干凈切片邊緣水。用顯微鏡找尋位置，觀察芽的結構，判斷其發育情況。

7.根據權利要求4所述的一種抑制枇杷成花的方法，其特征在于：所述烤片為顯微鏡初步看片后，將需要的切片編號注釋，置于40-50℃恒溫烘箱24h，所述脫蠟為將切片取出，置于純二甲苯A缸中10min，后置于純二甲苯B缸中15min，所述封片為取出脫蠟后的載玻片，在二甲苯未完全干燥前滴入適量中性樹脂，用蓋玻片沿邊緣小心蓋片，40-50℃過夜后烘干。