[發(fā)明專利]中間型循環(huán)腫瘤細(xì)胞作為腫瘤診斷和預(yù)后標(biāo)志物及其應(yīng)用

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202110088911.4
• 申請(qǐng)日: 2021-01-22
• 公開（公告）號(hào): CN112924363A
• 公開（公告）日: 2021-06-08
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 朱毅敏;周淦;周俊東;高波;李霖;孟祥州;李海洋
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 中國科學(xué)院蘇州納米技術(shù)與納米仿生研究所
• 主分類號(hào): G01N15/14
• 分類號(hào): G01N15/14;G01N21/64;B01L3/00
• 代理公司: 北京品源專利代理有限公司 11332
• 代理人: 鞏克棟

1.一種腫瘤診斷和預(yù)后標(biāo)志物，其特征在于，所述標(biāo)志物為中間型循環(huán)腫瘤細(xì)胞；

所述中間型循環(huán)腫瘤細(xì)胞表達(dá)上皮細(xì)胞表型蛋白和間質(zhì)細(xì)胞表型蛋白。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的標(biāo)志物，其特征在于，所述上皮細(xì)胞表型蛋白包括上皮細(xì)胞粘附分子；

優(yōu)選地，所述間質(zhì)細(xì)胞表型蛋白包括波形蛋白。

3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的標(biāo)志物，其特征在于，所述腫瘤包括卵巢癌、乳腺癌、肝癌或肺癌中的任意一種或至少兩種的組合。

4.一種腫瘤診斷和預(yù)后監(jiān)測(cè)產(chǎn)品，其特征在于，所述產(chǎn)品的靶分子為中間型循環(huán)腫瘤細(xì)胞；

所述中間型循環(huán)腫瘤細(xì)胞表達(dá)上皮細(xì)胞表型蛋白和間質(zhì)細(xì)胞表型蛋白。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的產(chǎn)品，其特征在于，所述產(chǎn)品包括微流控芯片和/或磁微粒；

所述微流控芯片和/或磁微粒上修飾有結(jié)合中間型循環(huán)腫瘤細(xì)胞的抗體、適配體或多肽中的任意一種或至少兩種的組合。

6.根據(jù)權(quán)利要求4或5所述的產(chǎn)品，其特征在于，所述微流控芯片和/或磁微粒上修飾有結(jié)合上皮細(xì)胞表型蛋白和間質(zhì)細(xì)胞表型蛋白的抗體、適配體或多肽中的任意一種或至少兩種的組合。

7.一種計(jì)數(shù)中間型循環(huán)腫瘤細(xì)胞的微流控芯片，其特征在于，所述微流控芯片包括串聯(lián)的第一捕獲芯片和第二捕獲芯片；

所述第一捕獲芯片修飾有靶向上皮細(xì)胞表型蛋白的多肽；

所述第二捕獲芯片修飾有靶向間質(zhì)細(xì)胞表型蛋白的多肽。

8.一種權(quán)利要求7所述的計(jì)數(shù)中間型循環(huán)腫瘤細(xì)胞的微流控芯片的制備方法，其特征在于，所述制備方法包括以下步驟：

(1)制備鏈霉親和素修飾微流控芯片；

(2)向所述鏈霉親和素修飾微流控芯片中分別加入生物素標(biāo)記靶向上皮細(xì)胞表型蛋白的多肽或生物素標(biāo)記靶向間質(zhì)細(xì)胞表型蛋白的多肽，得到第一捕獲芯片和第二捕獲芯片；

(3)將所述第一捕獲芯片和第二捕獲芯片串聯(lián)，得到所述計(jì)數(shù)中間型循環(huán)腫瘤細(xì)胞的微流控芯片。

9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的制備方法，其特征在于，步驟(2)所述靶向上皮細(xì)胞表型蛋白的多肽的濃度為100～500μM；

優(yōu)選地，步驟(2)所述靶向間質(zhì)細(xì)胞表型蛋白的多肽的濃度為100～500μM。

10.一種以非疾病診斷為目的的中間型循環(huán)腫瘤細(xì)胞的計(jì)數(shù)方法，其特征在于，所述計(jì)數(shù)方法包括以下步驟：

(1’)向權(quán)利要求7所述的計(jì)數(shù)中間型循環(huán)腫瘤細(xì)胞的微流控芯片中加入檢測(cè)樣本，所述中間型循環(huán)腫瘤細(xì)胞捕獲于微流控芯片上；

(2’)對(duì)微流控芯片捕獲的細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞固定后，進(jìn)行熒光染色，根據(jù)熒光染色結(jié)果計(jì)數(shù)中間型循環(huán)腫瘤細(xì)胞。