[發(fā)明專利]一種重組菌株及制備天麻苷元的方法有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 202110087348.9 | 申請日： | 2021-01-22 |
| 公開（公告）號： | CN112852697B | 公開（公告）日： | 2023-02-10 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | 徐德宏;譚朝陽;崔培梧;羅月芳;江靈敏;羅懷浩 | 申請（專利權(quán)）人： | 湖南中醫(yī)藥大學(xué) |
| 主分類號： | C12N1/21 | 分類號： | C12N1/21;C12N15/70;C12N15/53;C12N15/60;C12P7/22;C12R1/19 |
| 代理公司： | 北京潤平知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11283 | 代理人： | 黃志興 |
| 地址： | 410208 湖南省長沙*** | 國省代碼： | 湖南;43 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 重組 菌株 制備 天麻 方法 | ||
1.一種制備天麻苷元的方法，其特征在于，該方法包括：將酪氨酸裂解酶基因和4-羥基甲苯甲基羥化酶基因依次導(dǎo)入大腸桿菌出發(fā)菌株中得到重組菌株，將所述重組菌株進(jìn)行誘導(dǎo)培養(yǎng)后，接種至含有酪氨酸的培養(yǎng)基中進(jìn)行轉(zhuǎn)化培養(yǎng)，以轉(zhuǎn)化所述酪氨酸為天麻苷元；
其中，所述酪氨酸裂解酶基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示，所述4-羥基甲苯甲基羥化酶基因含有pchF基因和pchC基因，所述pchF基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示，所述pchC基因的核苷酸序列如SEQ IDNO:3所示；所述含有酪氨酸的培養(yǎng)基中酪氨酸的含量為0.01-0.05wt％，所述轉(zhuǎn)化培養(yǎng)至少滿足以下條件：接種量為10-30g/L、轉(zhuǎn)化溫度為25-40℃、轉(zhuǎn)化速度為200-300rpm、轉(zhuǎn)化時間為3-12h。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述重組菌株的出發(fā)菌株為大腸桿菌BL21(DE3)。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述重組菌株含有表達(dá)載體，所述表達(dá)載體為pcdfDUET-1。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述誘導(dǎo)培養(yǎng)的誘導(dǎo)劑含有異丙基-β-D-硫代半乳糖苷。
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