[發明專利]一種伯克氏菌及其在防治三七根腐病主要病原菌中的應用

有效

• 申請號: 202110087107.4
• 申請日: 2021-01-22
• 公開（公告）號: CN112646754B
• 公開（公告）日: 2023-04-07
• 發明（設計）人: 朱書生;楊敏;鄧琳梅;王羅濤;葉辰;梅馨月;劉屹湘;黃惠川;何霞紅;朱有勇
• 申請（專利權）人: 云南農業大學
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;A01N63/20;A01P21/00;A01P3/00;C09K17/14;C12R1/01;C09K101/00
• 代理公司: 北京中和立達知識產權代理有限公司 11756
• 代理人: 張攀

本發明提供了一種伯克氏菌(Burkholderiaspp.)B36,所述菌株對三七主要根腐病菌銹腐病菌有較強的抑制活性，對三七主要的皂苷類自毒物質(R1、Rg1、Re、Rb1和Rd)均存在較明顯的降解，尤其是對皂苷Rb1和Rd具有顯著的降解活性。具有廣闊的應用前景。

技術領域

本發明涉及一種菌株，具體涉及一種伯克氏菌株及其在防治三七根腐病主要病原菌中的應用。

背景技術

三七是云南文山地區主要的經濟作物，性喜溫暖陰濕，其獨特的生長環境容易誘發多種土傳病害。由于三七神奇的藥用功效，全球對三七及其相關產品的需求日益增加，而可供種植三七的區域并不多，因此大多數地區采取三七連作的種植方式。隨著三七種植年限的增加，土傳病害的種類、發病面積及嚴重程度逐年增加，嚴重損害三七的產量和質量，其中最主要的病害為根腐病。

根腐病是由于土壤中微生物失調，大量病原性和真菌侵染三七植株根部導致的，土壤中微生物失調是導致三七連作障礙的一個重要因素，目前常用的治理方法主要是施用殺菌劑，但是效果越來越不理想，而采用高效熏蒸劑進行土壤滅生處理，然后再補充益生菌劑調整微生物區系使土壤活化和健化的方法則成本較高，效果也不理想。

伯克氏菌是一種假單胞菌，廣泛分布于自然環境中，不同的菌株表型相同，但是基因型不同，有些類型的伯克氏菌在農業上可用作生物降解、生物控制及促進植物生長之根圈微生物，但還有一些是植物致病菌甚至是人體條件致病菌，而且由于伯克氏菌具有較強的抗生素抗藥性及較高的運動性，因此，在農業上應用伯克氏菌具有一定的潛在風險，在菌株的選擇上需得非常謹慎。中國專利201010290583.8公開了一種水稻根圍伯克氏菌，這個菌株在防治水稻紋枯病方面有非常好的效果，但是用這個菌株的菌懸液接種煙葉時，會在24小時內導致典型的過敏反應，因此，如果要利用伯克氏菌解決不同作物的土傳病害，如何分離純化出最合適的伯克氏菌株就很重要。

發明內容

為解決上述問題，本發明提供了一種伯克氏菌株及其在防治三七根腐病主要病原菌中的應用方法。

本發明提供一種伯克氏菌菌株(Burkholderia?spp.)B36，保藏編號為CGMCCNo.21179；保藏單位為中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心；保藏地址為北京市朝陽區北辰西路1號院3號，郵編：100101；保藏日期為2020年11月16日。

本發明所提供的伯克氏菌菌株B36為從健康三七根際土壤中分離得到，對其形態進行鑒定，具體結果如下：該菌為革蘭氏陰性菌，無芽孢短桿狀、菌落黃色、表面光滑隆起、邊緣不規則。

本發明還提供了一種采用上述伯克氏菌菌株B36制備的菌懸液及其應用，更為具體地，所述應用為可用于抑制三七根腐病菌、降解三七主要的皂苷類毒性物質以及緩解土壤連作效應。

本發明的有益效果如下：

本發明提供的伯克氏菌B36在抗菌實驗中能有效地拮抗三七根腐病主要病菌，如茄腐鐮刀菌和銹腐病菌，并且對三七皂苷類自毒物質具有顯著的降解作用，尤其對皂苷Rb1的降解活性最高，可達100％；此外，不同濃度的三七粗皂苷均未對菌株生長產生抑制，其中高濃度皂苷1.0g/L能明顯促進菌株生長。說明伯克氏菌B36能耐受較高濃度的粗皂苷，并且三七粗皂苷能促進菌株進行營養生長，在三七根系中占據更有利的生態位。粗皂苷會促進伯克氏菌B36生物膜的形成，加強其在根部的定殖。伯克氏菌B36對林下土中三七出苗具有一定的促進作用，尤其當土壤中存在自毒物質和根腐病菌(茄腐鐮刀菌和銹腐病菌)時，可以明顯促進三七的出苗，促進率分別為15.79％、60.0％和42.86％。

附圖說明

圖1為本實施例提供的伯克氏菌(Burkholderia?spp.)B36菌落圖。

圖2為本實施例提供的伯克氏菌(Burkholderia?spp.)B36革蘭氏染色圖。

圖3不同濃度三七粗皂苷對伯克氏菌B36生長的影響。