[發明專利]一種棉花隱性核不育恢復基因GhNSP及其應用和創制棉花雄性不育種質的方法有效
| 申請號： | 202110086687.5 | 申請日： | 2021-01-22 |
| 公開（公告）號： | CN112680455B | 公開（公告）日： | 2022-08-05 |
| 發明（設計）人： | 閔玲;張獻龍;吳元龍;郭小平 | 申請（專利權）人： | 華中農業大學 |
| 主分類號： | C12N15/29 | 分類號： | C12N15/29;C07K14/415;C12N15/113;C12N15/82;A01H5/02;A01H6/60 |
| 代理公司： | 北京方圓嘉禾知識產權代理有限公司 11385 | 代理人： | 李正 |
| 地址： | 430070 湖*** | 國省代碼： | 湖北;42 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 棉花 隱性 不育 恢復 基因 ghnsp 及其 應用 創制 雄性不育 種質 方法 | ||
1.一種棉花隱性核不育恢復基因GhNSP在棉花細胞核雄性不育系中的應用，所述基因GhNSP為以下核苷酸序列中的一種：
1）序列表SEQ ID NO：1中所示的DNA序列；
2）編碼序列表SEQ ID NO：2所示蛋白質的DNA序列。
2.一種用于基因編輯突變棉花隱性核不育恢復基因GhNSP的sgRNA，其特征在于，包括sgRNA1和sgRNA2；
所述sgRNA1的核苷酸序列如序列表SEQ ID NO：4所示；
所述sgRNA2的核苷酸序列如序列表SEQ ID NO：5中所示；
所述基因GhNSP為以下核苷酸序列中的一種：
1）序列表SEQ ID NO：1中所示的DNA序列；
2）編碼序列表SEQ ID NO：2所示蛋白質的DNA序列。
3.一種用于基因編輯棉花隱性核不育恢復基因GhNSP的CRISPR/Cas9系統，其特征在于，包括權利要求2所述sgRNA；
所述基因GhNSP為以下核苷酸序列中的一種：
1）序列表SEQ ID NO：1中所示的DNA序列；
2）編碼序列表SEQ ID NO：2所示蛋白質的DNA序列。
4.根據權利要求3所述CRISPR/Cas9系統，其特征在于，所述CRISPR/Cas9系統包括Cas9蛋白的T-DNA序列；
所述Cas9蛋白的T-DNA序列的核苷酸序列如序列表中SEQ ID NO：3所示。
5.一種敲除棉花隱性核不育恢復基因GhNSP的試劑在棉花細胞核雄性不育系中的應用，所述基因GhNSP為以下核苷酸序列中的一種：1）序列表SEQ ID NO：1中所示的DNA序列；
2）編碼序列表SEQ ID NO：2所示蛋白質的DNA序列。
6.根據權利要求5所述應用，其特征在于，所述試劑為權利要求2所述sgRNA或權利要求3或4所述CRISPR/Cas9系統。
7.根據權利要求1、5和6任意一項所述應用，其特征在于，所述棉花包括陸地棉。
8.一種創制棉花雄性不育種質的方法，其特征在于，包括以下步驟：
采用權利要求2所述sgRNA或權利要求3或4所述CRISPR/Cas9系統敲除陸地棉中基因GhNSP；
所述基因GhNSP為以下核苷酸序列中的一種：
1）序列表SEQ ID NO：1中所示的DNA序列；
2）編碼序列表SEQ ID NO：2所示蛋白質的DNA序列。
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