[發明專利]一種抗CD23特異性單克隆抗體及其應用

有效

• 申請號: 202110082852.X
• 申請日: 2021-01-21
• 公開（公告）號: CN112646036B
• 公開（公告）日: 2022-05-31
• 發明（設計）人: 彭勁武;劉楊;閔豆;程育苗
• 申請（專利權）人: 蘇州百道醫療科技有限公司;中南大學
• 主分類號: C07K16/28
• 分類號: C07K16/28;C07K1/22;C12N15/13;C12N15/85;G01N33/577;G01N33/574;G01N33/68
• 代理公司: 北京易捷勝知識產權代理事務所(普通合伙) 11613
• 代理人: 韓國勝

本發明涉及一種抗CD23特異性單克隆抗體，其重鏈可變區的氨基酸序列是如SEQ ID No：6所示的氨基酸序列，其輕鏈可變區的氨基酸序列是如SEQ ID No：7所示的氨基酸序列。該抗CD23特異性單克隆抗體，編碼所述抗CD23特異性單克隆抗體的重鏈可變區的核苷酸序列如SEQ ID No：4所示，編碼所述抗CD23特異性單克隆抗體的輕鏈可變區的核苷酸序列如SEQ ID No：5所示。本發明的抗CD23特異性單克隆抗體能準確識別淋巴造血系統中CD23分子，在慢性淋巴細胞白血病、縱隔大B細胞淋巴瘤和系統性紅斑狼瘡等疾病中呈陽性高表達。因此本發明抗CD23特異性單克隆抗體可用于準確診斷各種淋巴造血疾病，以提高診斷檢測的準確度。

技術領域

本發明涉及基因工程技術領域，尤其是一種抗CD23特異性單克隆抗體及其應用。

背景技術

CD23是一種相對分子量為45kDa的II型跨膜糖蛋白，為低親和力IgE受體，是唯一不屬于Ig超家族的Fc受體。CD23主要表達于免疫細胞，是B細胞活化及生長的重要分子。還可表達于T淋巴細胞、嗜酸性粒細胞、單核細胞、樹突細胞、血小板、腸上皮細胞以及骨髓基質細胞表面。CD23在這些細胞表面表達發揮著各種功能，比如調節IgE合成、細胞與細胞粘附、抗原呈遞、早期T細胞分化、肥大細胞及嗜堿性粒細胞釋放組胺、對寄生蟲的免疫攻擊、防止生發中心B細胞凋亡、炎癥反應調節、調節HIV 1的擴增等。

經研究發現CD23可作為腫瘤性疾病診斷、預后的指標及潛在的治療靶點。在淋巴造血疾病中，CD23標記胸腺髓質B細胞，據文獻報道原發性縱隔(胸腺)大B細胞淋巴瘤60%-85%表達CD23 ,而在非縱隔彌漫大B細胞淋巴瘤和結外彌漫大B細胞淋巴瘤中表達率較低，具有較高的敏感性、特異性及陽性預測值。此外，一些研究發現CD23與變態反應性疾病、自身免疫性疾病、白血病和腎小球疾病等多種疾病相關。這些疾病外周血淋巴細胞CD23陽性率顯著增加，并與疾病嚴重程度呈正相關，經有效治療后CD23陽性率顯著下降，這些研究為探索疾病發病機制和治療提供了新途徑。基于CD23的檢測指標在各種惡性腫瘤、轉移及預后等方面的重要應用，故獲得一株高靈敏度、強特異性的抗CD23抗體具有重要意義。

發明內容

（一）要解決的技術問題

鑒于現有技術問題，本發明提供一種抗CD23特異性單克隆抗體，該抗體能廣泛應用于各種淋巴造血疾病的診斷，且具有極高的特異性和靈敏度，有利于準確診斷。

本發明提供的抗CD23特異性單克隆抗體是由小鼠雜交瘤細胞株產生，經過多種不同組織的免疫組織化學檢測發現，該抗體可以很好的鑒別淋巴造血系統中腫瘤的發生，可以用于淋巴造血系統等疾病的免疫學診斷。

（二）技術方案

為了達到上述目的，本發明采用的主要技術方案包括：

第一方面，本發明提供一種抗CD23特異性單克隆抗體，其重鏈可變區的氨基酸序列是如SEQ ID No：6所示的氨基酸序列，其輕鏈可變區的氨基酸序列是具有如SEQ ID No：7所示的氨基酸序列。

第二方面，本發明提供一種抗CD23特異性單克隆抗體，編碼所述抗CD23特異性單克隆抗體的重鏈可變區的核苷酸序列如SEQ ID No：4所示，編碼所述抗CD23特異性單克隆抗體的輕鏈可變區的核苷酸序列如SEQ ID No：5所示。

其中，用ELISA技術測定該抗CD23特異性單克隆抗體的亞類為小鼠IgG1型單克隆抗體，解離常數為7×10^-7(mol/L)。免疫組織化學實驗顯示，該抗體能特異識別CD23蛋白，包括但不限于重組CD23抗原蛋白和淋巴造血系統中的CD23分子等。

第三方面，本發明提供一種抗CD23單克隆抗體的制備方法，包括：