[發(fā)明專利]MicroRNA-302c-3p作為NLRP3抑制劑的應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202110075394.7
• 申請(qǐng)日: 2021-01-20
• 公開（公告）號(hào): CN112941074B
• 公開（公告）日: 2022-06-28
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 于濤;褚現(xiàn)明;楊艷艷;柏寶辰
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 青島大學(xué)附屬醫(yī)院
• 主分類號(hào): C12N15/113
• 分類號(hào): C12N15/113;A61K31/7105;A61P9/10
• 代理公司: 北京酷愛智慧知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11514
• 代理人: 周俊

本發(fā)明公開了一種MicroRNA?302c?3p作為NLRP3抑制劑的應(yīng)用；本發(fā)明通過在線生物信息學(xué)數(shù)據(jù)庫篩選和鑒定直接靶向NLRP3的miRNA，并通過多種實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證篩選出最顯著的miR?302c?3p；miR?302c?3p通過直接結(jié)合NLRP3mRNA的特定位點(diǎn)抑制內(nèi)皮炎癥和焦亡；并通過尾靜脈注射miR?302c?3p agomir后，ApoE?/?小鼠的主動(dòng)脈炎癥和焦亡均得到改善；研究表明，miR?302c?3p/NLRP3在內(nèi)皮細(xì)胞中具有新的調(diào)控信號(hào)通路及其作用機(jī)制；MicroRNA?302c?3p能夠直接結(jié)合NLRP3mRNA的特定位點(diǎn)抑制NLPR激活，進(jìn)而抑制內(nèi)皮炎癥和焦亡，可達(dá)治療動(dòng)脈粥樣硬化的目的。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及NLRP3抑制劑技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種MicroRNA-302c-3p作為NLRP3抑制劑的應(yīng)用。

背景技術(shù)

動(dòng)脈粥樣硬化(Atherosclerosis,AS)是一種慢性炎癥性疾病，伴有脂質(zhì)積聚和內(nèi)皮功能障礙。早期診斷對(duì)于亞臨床動(dòng)脈粥樣硬化至關(guān)重要，因?yàn)閬喤R床動(dòng)脈粥樣硬化的潛伏期相當(dāng)長，且與心血管疾病密切相關(guān)。Ox-LDL是動(dòng)脈粥樣硬化性心血管疾病進(jìn)展的關(guān)鍵因素。簡單地說，ox-LDL被內(nèi)皮細(xì)胞的模式識(shí)別受體識(shí)別，并通過觸發(fā)級(jí)聯(lián)氧化應(yīng)激和炎癥反應(yīng)引起內(nèi)皮功能障礙，這是早期動(dòng)脈粥樣硬化的特征。從這個(gè)意義上說，內(nèi)皮細(xì)胞炎癥和免疫的及時(shí)干預(yù)可以延緩動(dòng)脈粥樣硬化。

NLRP3炎性小體是一種多聚蛋白復(fù)合體，在細(xì)胞內(nèi)發(fā)揮先天免疫信號(hào)平臺(tái)的作用，是炎癥和免疫的關(guān)鍵中介。其激活招募caspase-1前體，并觸發(fā)自身蛋白水解裂解活化caspase-1，導(dǎo)致gasdermin D(GSDMD)的裂解和膜破裂，伴有炎癥性程序性細(xì)胞死亡，稱為焦亡。同時(shí)釋放細(xì)胞因子白細(xì)胞介素(IL)-18和IL-1β。Duewell等發(fā)現(xiàn)NLRP3炎性小體被膽固醇晶體觸發(fā)和激活，導(dǎo)致慢性炎癥和動(dòng)脈粥樣硬化斑塊的形成，這揭示了NLRP3炎性小體在動(dòng)脈粥樣硬化中的關(guān)鍵作用。此后，NLRP3炎性小體參與動(dòng)脈粥樣硬化的機(jī)制在單核細(xì)胞和巨噬細(xì)胞等免疫細(xì)胞中得到了廣泛研究。然而，最近越來越多的研究報(bào)道NLRP3炎性小體也在內(nèi)皮細(xì)胞中發(fā)揮重要作用。Zhuang等人證實(shí)內(nèi)皮細(xì)胞Foxp1通過直接抑制NLRP3炎性小體激活來減輕內(nèi)皮細(xì)胞炎癥反應(yīng)。此外，Zhang等人發(fā)現(xiàn)褪黑素在內(nèi)皮細(xì)胞中發(fā)揮抗焦亡作用，這是通過調(diào)節(jié)LncRNA MEG3/miR-223/NLRP3軸來實(shí)現(xiàn)的。直接抑制NLRP3炎性小體激活不僅可以抑制IL-18和IL-1β的分泌，還可以抑制細(xì)胞焦亡的發(fā)生，進(jìn)一步降低局部炎癥的級(jí)聯(lián)反應(yīng)。越來越多的NLRP3炎性小體抑制劑被發(fā)現(xiàn)，如MCC950、BHB和OLT1177,可阻斷NLRP3炎性小體的激活，減少IL-18、IL-1β的釋放，從而延緩炎癥性疾病進(jìn)展。因此，NLRP3可能是心血管疾病的有效治療靶點(diǎn)。

非編碼RNA(ncRNAs)是細(xì)胞功能和疾病進(jìn)展的新型調(diào)控因子。近來，越來越多的證據(jù)表明，ncRNA在心血管疾病中起著關(guān)鍵的調(diào)節(jié)作用。MicroRNAs(miRNAs)是目前研究最徹底、高度保守的ncRNAs之一，其長度為20-25個(gè)核苷酸，在轉(zhuǎn)錄后通過沉默靶mRNA阻礙基因表達(dá)，從而涉及多種關(guān)鍵的細(xì)胞過程和疾病。miRNA作為炎癥的傳感器和內(nèi)皮穩(wěn)態(tài)的保護(hù)因子，調(diào)節(jié)內(nèi)皮細(xì)胞的功能。在這方面，新興文獻(xiàn)表明，miRNA也微調(diào)NLRP3炎癥小體激活的過程，這是通過在翻譯水平上降低NLRP3表達(dá)來實(shí)現(xiàn)的.然而，哪些miRNA在心血管領(lǐng)域?qū)LRP3功能影響最大仍有待進(jìn)一步研究。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于提供一種MicroRNA-302c-3p作為NLRP3抑制劑的應(yīng)用，MicroRNA-302c-3p能夠直接結(jié)合NLRP3 mRNA的特定位點(diǎn)能夠抑制NLPR激活，進(jìn)而抑制內(nèi)皮炎癥和焦亡，可達(dá)治療動(dòng)脈粥樣硬化的目的。

為了實(shí)現(xiàn)本發(fā)明的上述目的，特采用以下技術(shù)方案：

本發(fā)明第一方面提供一種MicroRNA-302c-3p作為NLRP3抑制劑的應(yīng)用。