[發(fā)明專(zhuān)利]一種具有促生活性的類(lèi)芽孢桿菌屬細(xì)菌及其制備和應(yīng)用

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202110069822.5
• 申請(qǐng)日: 2021-01-19
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN112608873A
• 公開(kāi)（公告）日: 2021-04-06
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 秦波;柳皓月;金輝;楊曉燕;程濟(jì)南;許欣欣;閔燈
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 中國(guó)科學(xué)院蘭州化學(xué)物理研究所
• 主分類(lèi)號(hào): C12N1/20
• 分類(lèi)號(hào): C12N1/20;A01N63/25;A01P21/00;C12R1/01
• 代理公司: 蘭州中科華西專(zhuān)利代理有限公司 62002
• 代理人: 曹向東

1.一種具有促生活性的類(lèi)芽孢桿菌屬細(xì)菌，其特征在于：該菌株為類(lèi)芽孢桿菌（Paenibacilluspabuli）B03，其保藏編號(hào)為CGMCC No.21386。

2.如權(quán)利要求1所述的一種具有促生活性的類(lèi)芽孢桿菌屬細(xì)菌的制備方法，其特征在于：選取健康紫花針茅帶根植株，將紫花針茅新鮮的根部切成長(zhǎng)度為0.2~0.5厘米的小段，經(jīng)消毒后用滅菌蒸餾水沖洗三次，并置于無(wú)菌濾紙上吸干水分；然后放置于NA平板培養(yǎng)基上，28±2℃避光培養(yǎng)；待平板上長(zhǎng)出肉眼可見(jiàn)的細(xì)菌菌落后，用無(wú)菌牙簽挑取少許菌落轉(zhuǎn)移至新的NA平板培養(yǎng)基上進(jìn)行純化，沒(méi)有污染，則轉(zhuǎn)入NA斜面培養(yǎng)基劃線(xiàn)在4℃下短期保存或轉(zhuǎn)入NA液體培養(yǎng)基和甘油的混合液中在-70℃下保存長(zhǎng)期保存即得。

3.如權(quán)利要求2所述的一種具有促生活性的類(lèi)芽孢桿菌屬細(xì)菌的制備方法，其特征在于：所述消毒是指對(duì)切段的紫花針茅新鮮的根部先經(jīng)體積濃度為75%的乙醇表面消毒30 s，再經(jīng)質(zhì)量濃度為3%的次氯酸鈉表面消毒5 min。

4.如權(quán)利要求2所述的一種具有促生活性的類(lèi)芽孢桿菌屬細(xì)菌的制備方法，其特征在于：所述NA平板培養(yǎng)基是指在1000mL水中加入蛋白胨10g、牛肉粉 3g、氯化鈉5g、瓊脂15g，混合均勻后調(diào)pH值至7.2~7.4，經(jīng)121℃滅菌30min制得。

5.如權(quán)利要求2所述的一種具有促生活性的類(lèi)芽孢桿菌屬細(xì)菌的制備方法，其特征在于：所述NA液體培養(yǎng)基是指在1000mL水中加入蛋白胨10g、牛肉粉 3g、氯化鈉5g，混合均勻后調(diào)pH值至7.2~7.4，經(jīng)121℃滅菌30min制得。

6.如權(quán)利要求2所述的一種具有促生活性的類(lèi)芽孢桿菌屬細(xì)菌的制備方法，其特征在于：所述肉眼可見(jiàn)的細(xì)菌菌落即colony-forming units，CFU為平均直徑在大于等于1 mm以上的菌落。

7.如權(quán)利要求6所述的一種具有促生活性的類(lèi)芽孢桿菌屬細(xì)菌的制備方法，其特征在于：所述肉眼可見(jiàn)的細(xì)菌菌落的計(jì)數(shù)方法是指濃度平板方法，即在直徑為90 mm的培養(yǎng)皿中，肉眼可見(jiàn)的單個(gè)分散的菌落數(shù)在100~150 CFU。

8.如權(quán)利要求2所述的一種具有促生活性的類(lèi)芽孢桿菌屬細(xì)菌的制備方法，其特征在于：所述NA液體培養(yǎng)基和甘油的混合液是指NA液體培養(yǎng)基與甘油按3:1的體積比混合均勻所得的溶液。

9.如權(quán)利要求1所述的一種具有促生活性的類(lèi)芽孢桿菌屬細(xì)菌的應(yīng)用，其特征在于：將滅菌后的類(lèi)芽孢桿菌（Paenibacilluspabuli）B03稀釋100倍所得的菌液作為紫花針茅牧草的植物生長(zhǎng)促生劑。