[發明專利]檢測單糖的方法

在審

• 申請號: 202110065985.6
• 申請日: 2021-01-18
• 公開（公告）號: CN112903842A
• 公開（公告）日: 2021-06-04
• 發明（設計）人: 張峰;馮峰;徐美霞;劉芳
• 申請（專利權）人: 中國檢驗檢疫科學研究院
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/72
• 代理公司: 北京鼎真知識產權代理事務所(普通合伙) 11815
• 代理人: 張濯非

本發明公開了一種檢測單糖的方法。該方法包括：將待測樣本進行提取處理，以便得到提取液；將所述提取液進行高效液相色譜?串聯質譜檢測，以便獲得所述單糖的含量，其中，所述高效液相色譜的色譜柱為Acquity BEH Amide色譜柱，規格為150mm×2.1mm，1.7μm。該方法利用高效液相色譜?串聯質譜進行檢測，并且，應用Acquity BEH Amide色譜柱對糖類同分異構體有較好的分離，檢測的靈敏度高，操作簡單、分析速度快、結果準確性高。

技術領域

本發明涉及分析化學領域，具體地，涉及檢測單糖的方法。

背景技術

多糖具有廣泛的生理活性，如：免疫調節作用、抗腫瘤、降血脂、抗衰老等作用。活性多糖組成往往比較復雜，對其進行單糖組成分析，對于進一步確定其結構和多糖質量，具有重要意義。多糖的單糖組成測定有多種方法，如薄層色譜法、氣相色譜法、高效毛細管電泳法、柱前衍生-高效液相色譜法等，但上述方法檢測的單糖種類少，準確度和靈敏度相對較低。

由此，單糖的檢測方法有待改進。

發明內容

本發明旨在至少解決現有技術中存在的技術問題之一。為此，本發明的一個目的在于提出一種檢測單糖的方法，該方法快速、簡單、靈敏度高。

根據本發明的一個方面，本發明提供了一種檢測單糖的方法。根據本發明的實施例，該方法包括：將待測樣本進行提取處理，以便得到提取液；將所述提取液進行高效液相色譜-串聯質譜檢測，以便獲得所述單糖的含量，其中，所述高效液相色譜的色譜柱為Acquity BEH Amide色譜柱，規格為150mm×2.1mm，1.7μm。

根據本發明實施例的檢測單糖的方法，利用高效液相色譜-串聯質譜進行檢測，并且，應用Acquity BEH Amide色譜柱對糖類同分異構體有較好的分離，檢測的靈敏度高，操作簡單、分析速度快、結果準確性高。

另外，根據本發明上述實施例的檢測單糖的方法，還可以具有如下附加的技術特征：

根據本發明的實施例，所述高效液相色譜為Acquity超高效液相色譜。

根據本發明的實施例，所述質譜為三重四級桿質譜。

根據本發明的實施例，所述高效液相色譜的流動相為：A：10mM甲酸銨溶液，B：含10mM甲酸銨-乙腈溶液。

根據本發明的實施例，梯度洗脫程序：10～20％A(0～7.5min)；20～40％A(7.5～9.5min)；40～10％A(9.5～9.51min)；10％A(9.51～13min)。

根據本發明的實施例，所述高效液相色譜的色譜條件為：流速0.2mL/min；進樣量5μL；柱溫30℃。

根據本發明的實施例，所述質譜的質譜條件：電噴霧離子(ESI)源；離子源溫度500℃；掃描方式：負離子模式；霧化氣GS1壓力55℃；輔助氣GS2壓力60℃；離子源噴霧電壓：-5.5kV；入口電壓：-10V；出口電壓：-13V。

根據本發明的實施例，所述單糖包括甘露醇、巖藻糖、鼠李糖、阿拉伯糖、半乳糖、葡萄糖、木糖、甘露糖、核糖、果糖、半乳糖醛酸、葡萄糖醛酸和蔗糖。

本發明的附加方面和優點將在下面的描述中部分給出，部分將從下面的描述中變得明顯，或通過本發明的實踐了解到。

附圖說明

本發明的上述和/或附加的方面和優點從結合下面附圖對實施例的描述中將變得明顯和容易理解，其中：

圖1顯示了根據本發明一個實施例的半乳糖、甘露糖、葡萄糖、果糖一組同分異構體在不同固定相中的色譜示意圖，其中，A為XBridge Amide色譜柱；B為Acquity BEH HILIC色譜柱；C為Inertsustain NH₂色譜柱；D為Acquity BEH色譜柱；