[發(fā)明專利]檢測(cè)綠原酸類化合物異構(gòu)體的方法

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202110065983.7
• 申請(qǐng)日: 2021-01-18
• 公開（公告）號(hào): CN112903841A
• 公開（公告）日: 2021-06-04
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 張峰;馮峰;汪恩婷;劉芳;徐美霞
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 中國(guó)檢驗(yàn)檢疫科學(xué)研究院
• 主分類號(hào): G01N30/02
• 分類號(hào): G01N30/02;G01N30/72
• 代理公司: 北京鼎真知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 11815
• 代理人: 張濯非

本發(fā)明公開了檢測(cè)綠原酸類化合物異構(gòu)體的方法。該方法包括：將樣品進(jìn)行粉碎處理，以便得到樣品粉末；將所述樣品粉末進(jìn)行超聲提取，以便得到提取液；以及利用液相色譜?串聯(lián)三重四極桿質(zhì)譜聯(lián)用系統(tǒng)對(duì)所述提取液進(jìn)行檢測(cè)，以便獲得所述綠原酸類化合物異構(gòu)體的含量。該方法檢測(cè)的速度快，準(zhǔn)確性和靈敏度高。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及分析化學(xué)領(lǐng)域，具體地，涉及檢測(cè)綠原酸類化合物異構(gòu)體的方法。

背景技術(shù)

綠原酸類化合物(chlorogenic acids，CGA)主要來源于忍冬科植物的干燥花蕾或杜仲、咖啡等，是一類由咖啡酸(Caffeic acid)與奎尼酸(Quinic acid，1-羥基六氫沒食子酸)生成的縮酚酸類化合物。如圖1所示，奎尼酸C3、C4和C5等多個(gè)位點(diǎn)均可以結(jié)合咖啡酸，此外，還有些類似咖啡酸的結(jié)構(gòu)也可以和奎尼酸結(jié)合，因此，綠原酸類化合物有很多種。藥理學(xué)的研究表明，綠原酸具有抗病原微生物、抗炎、解熱、保肝、降血脂、止血、免疫調(diào)節(jié)等作用，臨床主要用于治療各種感染、炎癥、高血脂、腫瘤放療等。

目前，對(duì)綠原酸的功效成分研究主要為液相色譜法或是液相色譜-串聯(lián)四極桿分析方法，但分析種類大多針對(duì)的是6種綠原酸類化合物的分析，而受分離技術(shù)的限制，對(duì)于6種以上的綠原酸類化合物的同時(shí)分離，目前仍面臨著巨大的挑戰(zhàn)。

由此，檢測(cè)綠原酸類化合物異構(gòu)體的方法有待改進(jìn)。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明旨在至少解決現(xiàn)有技術(shù)中存在的技術(shù)問題之一。為此，本發(fā)明的一個(gè)目的在于提出一種檢測(cè)綠原酸類化合物異構(gòu)體的方法，該方法檢測(cè)速度快，準(zhǔn)確度高，且能對(duì)多種綠原酸類化合物異構(gòu)體進(jìn)行檢測(cè)。

研究表明，綠原酸類化合物，在包括金銀花、山銀花以及咖啡等食品中大量存在，且為各種異構(gòu)體混合存在的模式，這些異構(gòu)體的含量，會(huì)因物種、產(chǎn)地、加工方式等的差異而發(fā)生較大變化。而綠原酸類化合物的結(jié)構(gòu)上的差異，又會(huì)對(duì)其的功效產(chǎn)生較大影響。受分離技術(shù)的限制，目前的分析方法僅僅是通過對(duì)6種綠原酸類標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行分離而開發(fā)的分析方法，這導(dǎo)致這些分析方法無法判斷所分析的綠原酸類化合物的某個(gè)色譜峰是一純品還是混合物，這也給后面的準(zhǔn)確定量帶來較大風(fēng)險(xiǎn)。由于某些含量很低的新型綠原酸類化合物，可能含有更高的功效，因此，開發(fā)快速、準(zhǔn)確的綠原酸類化合物的分析方法就非常有必要。發(fā)明人通過優(yōu)化樣品的處理?xiàng)l件和檢測(cè)條件，利用超高效液相色譜-串聯(lián)三重四極桿質(zhì)譜聯(lián)用系統(tǒng)對(duì)食品中的綠原酸類化合物進(jìn)行精準(zhǔn)定量，整個(gè)分析過程快速，準(zhǔn)確性和靈敏度高，并且能對(duì)8種綠原酸類化合物同時(shí)進(jìn)行分離檢測(cè)。

因而，根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)方面，本發(fā)明提供了一種檢測(cè)綠原酸類化合物異構(gòu)體的方法。根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施例，該方法包括：將樣品進(jìn)行粉碎處理，以便得到樣品粉末；將所述樣品粉末進(jìn)行超聲提取，以便得到提取液；以及利用液相色譜-串聯(lián)三重四極桿質(zhì)譜聯(lián)用系統(tǒng)對(duì)所述提取液進(jìn)行檢測(cè)，以便獲得所述綠原酸類化合物異構(gòu)體的含量。

根據(jù)本發(fā)明實(shí)施例的檢測(cè)綠原酸類化合物異構(gòu)體的方法，通過超聲提取，對(duì)樣品中的綠原酸類化合物異構(gòu)體進(jìn)行提取，待測(cè)化合物提取的更充分，且有效成分損失小。并利用液相色譜-串聯(lián)三重四極桿質(zhì)譜聯(lián)用系統(tǒng)進(jìn)行檢測(cè)，檢測(cè)的速度快，準(zhǔn)確性和靈敏度高。

另外，根據(jù)本發(fā)明上述實(shí)施例的檢測(cè)綠原酸類化合物異構(gòu)體的方法，還可以具有如下附加的技術(shù)特征：

根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施例，所述樣品粉末的粒度不大于40目。

根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施例，利用50％甲醇水溶液進(jìn)行所述超聲提取。

根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施例，所述樣品粉末與所述50％甲醇水溶液的比例為lmg：45-55mL。

根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施例，所述超聲提取的功率為300W，頻率為40kHz，時(shí)間為45min。

根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施例，所述液相色譜-串聯(lián)三重四極桿質(zhì)譜聯(lián)用系統(tǒng)的流動(dòng)相為：A：乙腈；B；0.1％甲酸水溶液。