[發明專利]一種用于鑒定甘藍葉片蠟粉性狀的分子標記、引物對及其應用在審
| 申請號： | 202110060928.9 | 申請日： | 2021-01-18 |
| 公開（公告）號： | CN112813180A | 公開（公告）日： | 2021-05-18 |
| 發明（設計）人： | 許園園;曾愛松;宋立曉;邢苗苗;嚴繼勇 | 申請（專利權）人： | 江蘇省農業科學院 |
| 主分類號： | C12Q1/6895 | 分類號： | C12Q1/6895;C12Q1/6858;C12N15/11 |
| 代理公司： | 南京蘇高專利商標事務所(普通合伙) 32204 | 代理人： | 丁靜靜 |
| 地址： | 210014 江蘇*** | 國省代碼： | 江蘇;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 用于 鑒定 甘藍 葉片 性狀 分子 標記 引物 及其 應用 | ||
1.一種用于鑒定甘藍葉片蠟粉性狀的分子標記，其特征在于，所述分子標記的核苷酸序列如SEQ ID NO.：1所示。
2.用于鑒定甘藍葉片蠟粉性狀的引物對，其特征在于，包括如下引物對：
上游引物Bol-Del2-F1：5’-CCTCGAAACAAACAGCCACG-3’；
下游引物Bol-Del2-R1：5’-CTCTTCGGGTTGGCATTCCT-3’。
3.權利要求2所述引物對在制備甘藍葉片蠟粉性狀檢測試劑中的應用。
4.權利要求2所述引物對在鑒定甘藍葉片蠟粉性狀中的應用。
5.一種鑒定甘藍葉片蠟粉性狀的方法，其特征在于，包括如下步驟：
(1)提取待檢測甘藍植株的基因組DNA；
(2)以步驟(1)得到的基因組DNA為模板，利用SEQ ID NO.：2～3所示的引物對進行PCR擴增；
(3)對PCR擴增產物進行電泳檢測；
若電泳檢測結果在84bp處有特異性條帶，則待檢測甘藍植株為有蠟粉單株；
若電泳檢測結果在84bp處無特異性條帶，則待檢測甘藍植株為亮葉單株。
6.根據權利要求5所述的鑒定甘藍葉片蠟粉性狀的方法，其特征在于，步驟(2)中，所述PCR擴增，其PCR擴增體系為20μl體系，包括：基因組DNA 1μl、上下游引物各1μl、2xEasyTaqPCR SuperMix 10μl、余量用水補齊。
7.根據權利要求5所述的鑒定甘藍葉片蠟粉性狀的方法，其特征在于，步驟(2)中，所述PCR擴增，其PCR擴增的條件如下：
94℃預變性3min；94℃變性50S，60℃50S，72℃延伸100S，35個循環；72℃延伸10min。
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