[發明專利]靶式凝膠電泳分離微納尺度物質的方法在審
| 申請號: | 202110059215.0 | 申請日: | 2021-01-18 |
| 公開(公告)號: | CN112680438A | 公開(公告)日: | 2021-04-20 |
| 發明(設計)人: | 李東浩;劉璐;崔嘉軒 | 申請(專利權)人: | 延邊大學 |
| 主分類號: | C12N15/10 | 分類號: | C12N15/10;C07K1/26 |
| 代理公司: | 延邊科友專利商標代理有限公司 22104 | 代理人: | 柳明哲 |
| 地址: | 133000 吉林省延*** | 國省代碼: | 吉林;22 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 凝膠電泳 分離 尺度 物質 方法 | ||
1.一種靶式凝膠電泳分離微納尺度物質的方法,包括如下步驟:
①提供靶式凝膠分離裝置槽,將一定濃度的凝膠放入制備好的圓盤配膠板中,插入樣品槽模具,凝膠自然冷卻形成圓盤型凝膠,然后拔掉樣品槽模具;
②在制備好的圓盤型凝膠中放置外環電極和中心電極,電極與電源連接,使圓盤凝膠中形成非勻強電場;
③加入電泳緩沖溶液后,進行上樣并電泳分離,微納尺度物質在堿性緩沖溶液條件下表面帶負電荷,在凝膠中向中心正電極運動;
④調節所施加的電參數調控目標物的泳動速度及路徑,較小分子量的目標分子將率先到達中心電極附近進行濃縮,較大分子量的目標分子將最后到達中心電極處濃縮;調節凝膠濃度調控分離條帶展寬;調節加電時間實現樣品組分分步在圓心處進行濃縮;調節緩沖溶液濃度來調控離子強度控制目標分子的帶電量及運動速度。
2.根據權利要求1所述的一種靶式凝膠電泳分離微納尺度物質的方法,其特征是所述的非均勻電場,在圓盤凝膠圓心處的電場強度最大。
3.根據權利要求1所述的一種靶式凝膠電泳分離微納尺度物質的方法,其特征是所述的圓盤配膠板的直徑范圍在1 cm-30 cm。
4.根據權利要求1所述的一種靶式凝膠電泳分離微納尺度物質的方法,其特征是所述的外環電極和中心電極材質為鉑、銀或銅材質。
5.根據權利要求1所述的一種靶式凝膠電泳分離微納尺度物質的方法,其特征是所述的凝膠為瓊脂糖凝膠,凝膠濃度在0.5-3.0%。
6.根據權利要求1所述的一種靶式凝膠電泳分離微納尺度物質的方法,其特征是所述的所述的樣品槽模具是圓環形狀樣品槽模具或者是鋸齒形樣品槽模具。
7.根據權利要求1所述的一種靶式凝膠電泳分離微納尺度物質的方法,其特征是所述的電參數為:電源為直流電源或交流電源,直流電壓1-200 V,交流電壓0-200V、頻率0-100Hz、Duty值1-99%、時間1-90 min。
8.根據權利要求1所述的一種靶式凝膠電泳分離微納尺度物質的方法,其特征是所述的不同的微納尺度物質目標分子在一定的電泳條件下,在非均勻電場條件下分離并形成靶式分布條帶,隨著電泳時間增加將先后到達中心電極附近進行濃縮。
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