[發(fā)明專利]處理nisin廢水pH的菌種篩選、應(yīng)用及處理方法

在審

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• 申請日: 2021-01-18
• 公開（公告）號: CN112852634A
• 公開（公告）日: 2021-05-28
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 童應(yīng)凱;張怡;趙寶頂;陳二路;張靚;楊紅鵬;宋平;黃海東
• 申請（專利權(quán)）人: 天津農(nóng)學(xué)院
• 主分類號: C12N1/02
• 分類號: C12N1/02;C12N1/14;C02F3/34;C12R1/79
• 代理公司: 廣州天河萬研知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 44418
• 代理人: 陳軒

本發(fā)明公開了一種處理nisin廢水pH的菌種篩選、應(yīng)用及處理方法，所述方法為從土壤中篩選出可直接在nisin廢水中生長繁殖并能夠處理nisin廢水的菌種，得到了一株菌株，經(jīng)鑒定為宛氏擬青霉具有耐酸、抗nisin的性能，在培養(yǎng)基中保持活力，利用發(fā)酵法將宛氏擬青霉接入nisin廢水中，通氣攪拌7～9天，即可使nisin廢水的pH達(dá)到中性且COD下降60％～90％。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及生物技術(shù)領(lǐng)域，尤其是一種處理nisin廢水pH的菌種篩選、應(yīng)用及處理方法。

背景技術(shù)

Nisin是一種乳酸鏈球菌素的天然生物活性抗菌肽，是具有很強(qiáng)殺菌作用的小分子肽，由乳酸球菌屬微生物代謝過程中合成和分泌的，是利用生物分離技術(shù)提取的一種安全、高效、純天然的活性物質(zhì)。目前，Nisin在我國的年產(chǎn)量已超過250噸，但是伴隨Nisin生產(chǎn)的同時(shí)也會產(chǎn)生大量的發(fā)酵廢液，所以我國每年超過5萬噸廢液排放量就是Nisin產(chǎn)生的。在生產(chǎn)乳酸鏈球菌生產(chǎn)后，提取Nisin后剩余的廢棄物為Nisin發(fā)酵廢水，具有C/N低、氯離子濃度高、pH低、COD高等特點(diǎn)，作為廢棄液，直接排放的話將會對環(huán)境產(chǎn)生十分惡劣的影響。傳統(tǒng)的廢液處理方法是采用加水稀釋，直至符合我國污水排放標(biāo)準(zhǔn)。但是該方法會浪費(fèi)大量的水資源，同時(shí)并不符合工廠生產(chǎn)中低成本高效益的原則，不能適用于較大規(guī)模的生產(chǎn)。

目前的科研與生產(chǎn)中，為了使被處理發(fā)酵廢水的各項(xiàng)指標(biāo)達(dá)到國家規(guī)定的排放標(biāo)準(zhǔn)，對發(fā)酵廢水處理的最終目的是去除Nisin廢水中殘留的糖等高濃度、有機(jī)營養(yǎng)物質(zhì)和含有的蛋白質(zhì)，提高Nisin廢水的pH和降低廢水的COD值。現(xiàn)階段，Nisin發(fā)酵廢水處理的方法有很多種，包括物理化學(xué)法、生化法、化學(xué)法、物理法、物理生物法，近幾年還出現(xiàn)了超滲透壓處理污水技術(shù)。

近幾年才在國內(nèi)應(yīng)用到了污水處理領(lǐng)域的新技術(shù)是生化法污水處理技術(shù)。其原理是通過微生物的新陳代謝作用，將污水的污染物質(zhì)通過生化反應(yīng)分解為簡單的無害物質(zhì)，達(dá)到污水處理的目的。在國外生活污水的處理方面，生化法污水處理技術(shù)已經(jīng)得到了嘗試，并取得了較好的處理效果，且顯示出了其處理效果好、成本低、工藝簡單的特點(diǎn)。現(xiàn)在很多廢水的處理都是用生化法，糖蜜廢水處理的核心就是生化法，在70年代時(shí)腈綸廢水就采用生化法處理，焦化廢水的處理上國內(nèi)各焦化企業(yè)大多采用生化法處理，但生化法處理nisin廢水的方法還都處在實(shí)驗(yàn)室階段，沒有可行的工廠話方案，主要是nisin廢水的pH過低，很多菌種都不生長或者生長太緩慢，而本發(fā)明解決的就是現(xiàn)有菌株處理nisin廢水的問題，重新篩選出一株菌株，使其在工廠適用。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是為了解決上述現(xiàn)有技術(shù)的不足而提供處理nisin廢水pH的菌種篩選、應(yīng)用及處理方法，提供一株新的菌種，方便工廠處理nisin廢水。

為了實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明所設(shè)計(jì)的一種處理nisin廢水pH的菌種的篩選方法，具體采用以下步驟：

(1)土壤菌懸液的制備

從nisin廢水排放口取土壤樣品，接入無菌水，制成土壤菌懸液；

(2)土壤菌株的初篩

將nisin廢水加入適量的瓊脂制成平板，將土壤菌懸液涂布在平板上，放入28℃-37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，7天后得到2株菌株；

(3)土壤菌株的復(fù)篩

將(2)中得到的2株菌株用pH為4的PDA培養(yǎng)基培養(yǎng)3天，然后接入到nisin廢水中28℃-30℃通氣培養(yǎng)；當(dāng)發(fā)現(xiàn)其中一株菌株優(yōu)于另外一株時(shí)，經(jīng)過測序鑒定為宛氏擬青霉。

作為優(yōu)選，所述pH為4的培養(yǎng)基的原料分別是：馬鈴薯20％，葡萄糖2％，然后將馬鈴薯切碎煮沸30分鐘，取汁加入2％的葡萄糖，最后用稀鹽酸將pH調(diào)節(jié)到4。

本發(fā)明還公開了一種利用宛氏擬青霉處理廢水的方法，將宛氏擬青霉應(yīng)用在nisin廢水處理上。