[發明專利]一種FBXW7環狀RNA的改構體及其在腫瘤藥物和新冠疫苗中的應用

有效

• 申請號: 202110058902.0
• 申請日: 2021-01-17
• 公開（公告）號: CN112574997B
• 公開（公告）日: 2023-07-21
• 發明（設計）人: 何越峰;譚婧文;周倩;尹錦瑤;孫明軍;毛一竹
• 申請（專利權）人: 楷拓生物科技（蘇州）有限公司;武漢楷拓生物科技有限公司;上?？厣锟萍加邢薰?/a>
• 主分類號: C12N15/113
• 分類號: C12N15/113;A61K48/00;A61K39/00;A61K39/215;A61P35/00
• 代理公司: 廣州海藻專利代理事務所(普通合伙) 44386
• 代理人: 付朝文

本發明涉及一種在天然的FBXW7環狀RNA的基礎上，進行大量的人工序列改造后的環狀RNA改構體，該改構體具有優良的翻譯以及翻譯終止作用，在改構體的插入位點插入適當的蛋白質編碼RNA序列之后，可以在體內表達該蛋白，蛋白的不同可以具有不同的效應，可以來制備腫瘤治療藥物也可以用來制備新冠疫苗。

技術領域

本發明屬于生物技術應用領域?，具體地涉及種FBXW7環狀RNA的改構體，進人工序列改造后的環狀RNA改構體，該改構體具有優良的翻譯以及翻譯終止作蛋白質編碼RNA序列之后，可以在體內表達該蛋白，蛋白的不同可以具有不同的效應，可以來制備腫瘤治療藥物也可以用來制備新冠疫苗。

背景技術

疫苗是將病原微生物及其代謝產物，經過人工減毒、滅活或利用轉基因等方法制成的用于預防傳染病的自動免疫制劑。接種疫苗是預防傳染病的有效方法。疫苗可增強免疫力，并使個體對病原體感染具有抵抗力。疫苗可能含有減毒活病原體（通常是病毒），滅活的完整病原體，類毒素（導致疾病的細菌產生的毒素的滅活形式）或病原體的一部分（例如天然或重組蛋白，多糖，結合多糖或病毒）?-類粒子）,也可能含有佐劑以刺激免疫反應。按其性質可分為減毒活疫苗、滅活疫苗、抗毒素、亞單位疫苗（含多肽疫苗）、載體疫苗、核酸疫苗等。

mRNA是介于蛋白質編碼DNA的翻譯和核糖體在細胞質中產生蛋白質之間的中間步驟。與基于pDNA和基于病毒載體的疫苗相比，基于mRNA的疫苗具有多個優勢。mRNA疫苗不會產生感染性顆?；虿粫系剿拗骷毎幕蚪M中。它們可以原位遞送以表達抗原，而無需穿過核膜屏障進行蛋白質表達，并且可以表達復雜的抗原而無包裝限制。使用完全合成的生產工藝，可以在獲得基因序列信息的幾天之內快速生產mRNA疫苗。該平臺具有多功能性，可適應多個目標，因此非常適合對新興病原體的快速反應。目前正在研究兩種主要類型的RNA作為疫苗：非復制性mRNA和病毒衍生的自擴增RNA。常規的基于mRNA的疫苗編碼目標抗原，并包含5'和3'非翻譯區（UTR），而自擴增RNA不僅編碼抗原，而且還編碼能夠使細胞內RNA擴增和豐富的蛋白質表達的病毒復制機制。mRNA疫苗具有強大的潛力，快速開發的能力以及低成本生產和安全管理的潛力，因此可以替代常規疫苗。然而，直到最近，由于mRNA的體內遞送的不穩定性和低效，它們的應用受到了限制?，F在，最新的技術進步已在很大程度上克服了這些問題，針對傳染病和多種類型癌癥的多種mRNA疫苗平臺已在動物模型和人類中證明了令人鼓舞的結果。

環狀RNA?(circRNA)是一種封閉結構的內源性長鏈非編碼RNA,是通過對前體mRNA(pre-mRNAs)片段的反向剪切后并以共價鍵形式首尾相連而形成，被認為是非編碼RNA這一大家族中最為穩定的RNA分子。circRNA可以影響重要mRNA的衰變，翻譯和轉錄，從而影響控制健康和疾病的基因表達程序。在過去circRNA因其編碼蛋白基因的起始密碼子和/或終止密碼子被刪除故被認為是一種不能被編碼為蛋白質的長鏈非編碼RNA。但近年來研究發現，部分circRNA可以編碼為特定的蛋白質來影響腫瘤的發生發展。盡管尚未完全了解circRNA的產生方式，但許多是通過反向剪接反應共價連接pre-mRNA特定片段的5'和3'末端（跨越外顯子或外顯子與內含子的組合）而產生的，而規范剪接有助于生成一些內含子circRNA。鑒于circRNA缺少暴露的5'和3'末端，因此可以保護它們免受核酸外切酶降解，因此通常認為它們比其線性宿主轉錄物更穩定。circRNA翻譯時只能采用與帽無關的方式,除了M6A介導的翻譯，人工和含有內部核糖體進入位點（IRES），其直接招募核糖體，也可譯為蛋白質。這兩種方法可以彼此耦合。例如circRNA以獨立于IRES的方式經歷滾環擴增，從而導致生產力比線性轉錄本高100倍。值得注意的是，?circRNA還可以與剪接因子，轉錄因子和RNA結合蛋白（RBP）相互作用，并且某些circRNA可以與核糖體結合并進行翻譯。

發明內容

本發明的目的在于提供一種FBXW7環狀RNA的改構體及其腫瘤與新冠疫苗中的應用。